"LLC-MK2細胞：恒河猴腎細胞系
細胞背景資料：胚胎；腎；自發(fā)永生
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁
如何進行細胞復蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞，計數(shù)，調(diào)整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。【溫馨提醒】１)從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進入凈化室前先關閉紫外燈，打開超凈臺風機，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復工作臺面。
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
NRK-49F細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞
SF-767細胞系相關產(chǎn)品：SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞
SRA01/04細胞系相關產(chǎn)品：SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
Ramos細胞系相關產(chǎn)品：CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞
NCI-H2196細胞系相關產(chǎn)品：MA-104細胞、6-10B細胞、H-1915細胞
NCIH2171細胞系相關產(chǎn)品：CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞
MIN6細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞
M059K細胞系相關產(chǎn)品：NMCG1細胞、C-Lu65細胞、M07e細胞
SW480E細胞系相關產(chǎn)品：MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
CAL-120細胞系相關產(chǎn)品：Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞
HCC0070細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞
RERF-LC-MS細胞系相關產(chǎn)品：NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞
SW 579細胞系相關產(chǎn)品：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞
UACC812細胞系相關產(chǎn)品：SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞
OCI/AML5細胞系相關產(chǎn)品：ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞
OCI-Ly01細胞系相關產(chǎn)品：Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞
SN12CPM6細胞系相關產(chǎn)品：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
GTL-16細胞系相關產(chǎn)品：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
H146細胞系相關產(chǎn)品：NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞
U266BL細胞系相關產(chǎn)品：HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞
GM05862細胞系相關產(chǎn)品：H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關產(chǎn)品：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
U266細胞系相關產(chǎn)品：MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
HT1080細胞系相關產(chǎn)品：PK-13細胞、PANC.1細胞、OS-732細胞
H498細胞系相關產(chǎn)品：MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
COLO 320 DM細胞系相關產(chǎn)品：HT 1197.T細胞、WPMY1細胞、SK-MEL-2-LUC細胞
SupB15W細胞系相關產(chǎn)品：SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞
FRTL 5細胞系相關產(chǎn)品：RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞
GalK1細胞系相關產(chǎn)品：CaEs17細胞、T/G HA VSMC細胞、MB-49細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關產(chǎn)品：BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
SiHa細胞系相關產(chǎn)品：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關產(chǎn)品：U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
H-2087細胞系相關產(chǎn)品：PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
A 72細胞系相關產(chǎn)品：AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
Hs 746T細胞系相關產(chǎn)品：APRE-19細胞、KHYG1細胞、EnCa1細胞
U-343細胞系相關產(chǎn)品：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞
AN3 CA細胞系相關產(chǎn)品：BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞
Hx-147細胞系相關產(chǎn)品：PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞
C32r細胞系相關產(chǎn)品：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
M21細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
Hs 688(A).T細胞系相關產(chǎn)品：SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
P3/X63/Ag8細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞
LIPF178C細胞系相關產(chǎn)品：NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞
Daoy細胞系相關產(chǎn)品：KMB-17細胞、UMRC-2細胞、Rat-2細胞
H-2126細胞系相關產(chǎn)品：A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞
ATDC5細胞系相關產(chǎn)品：L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關產(chǎn)品：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
Hs-600-T細胞系相關產(chǎn)品：H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞
P3X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：SW 48細胞、CMT-167細胞、Beta-TC-6細胞
RPMI6666細胞系相關產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
BTT739細胞系相關產(chǎn)品：U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞
NCTC-1469細胞系相關產(chǎn)品：COLO-357細胞、Jeko1細胞、FRhK4細胞
BV2細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 520細胞、HCC-2108細胞、SKG3A細胞
AG06814-M細胞系相關產(chǎn)品：J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞
HUCCT1細胞系相關產(chǎn)品：Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞
HPDE6c7細胞系相關產(chǎn)品：B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞
SiHa細胞系相關產(chǎn)品：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
P31 FUJ細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB453細胞、PAMC82細胞、NT2/D1細胞
P19細胞系相關產(chǎn)品：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞
NCI-H1770細胞系相關產(chǎn)品：SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞
HCC1588細胞系相關產(chǎn)品：H-211細胞、MDA-kb2細胞、H-3255細胞
TE-10細胞系相關產(chǎn)品：NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞
COLO-741細胞系相關產(chǎn)品：HPAF2細胞、Swiss/3T3細胞、MDA-435細胞
Bovine Turbinate細胞系相關產(chǎn)品：MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞
COLO-320DM細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞
SUIT2細胞系相關產(chǎn)品：rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞
Sup T-1細胞系相關產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞
NKM1細胞系相關產(chǎn)品：ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞
AML-12細胞系相關產(chǎn)品：HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞
293F細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞
NCI-H2198細胞系相關產(chǎn)品：Ca761細胞、S.B.細胞、EHEB細胞
H184A1細胞系相關產(chǎn)品：28SC細胞、NR8383.1細胞、SCL1細胞
SRA01/04細胞系相關產(chǎn)品：SUM-149PT細胞、NCI-H2087細胞、RT4-D6-P2T細胞
HUT-28細胞系相關產(chǎn)品：Ly18細胞、H-1755細胞、NT-2細胞
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