"KMB-17細(xì)胞：人二倍體細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)７２小時(shí))；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí)，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō)，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類(lèi)、血清種類(lèi)和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類(lèi)，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對(duì)細(xì)胞而言差異極大，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類(lèi)培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)和濃度，于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞
SF295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2081細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞、PK136細(xì)胞
3T3-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、C-127細(xì)胞、VK2細(xì)胞
T98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4:11細(xì)胞、130T細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞
MDA-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS(TE85)細(xì)胞、MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、OC 316細(xì)胞
G519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H747細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞
JHH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354.T細(xì)胞、GM03190細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞
NCIH1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞
kms 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hopkins-92細(xì)胞、293-EBNA1細(xì)胞、H-1155細(xì)胞
UCLA NPA871細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB106細(xì)胞、A2780 CP70細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞
NIH:OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC TERT1細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞
COLO684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP5d細(xì)胞、MDA134細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞
SK-MES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞
KS-SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-668細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞
BSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta-519細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、H69/P細(xì)胞
SW 982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Danio rerio Gill細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞
SW 982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Danio rerio Gill細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞
RPMI 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63.Ag8.653細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞
CV-1.K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVMANA細(xì)胞、Ku812F細(xì)胞、RH8994細(xì)胞
NCIH211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞
CHO K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞
NRK-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL 28細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞
KLM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-4細(xì)胞、ESC-410細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞
NCIH661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YTMLC-90細(xì)胞、H1618細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞
Functional Liver Cell-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OK-WT細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞
WIL2-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 824細(xì)胞、TH1細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞
Porcine Kidney-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1048細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞
GM02131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-3960細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞
BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSF細(xì)胞、SW-962細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞
RCC 7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞
H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C-13細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞、KB細(xì)胞
VMRC-RCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-839細(xì)胞、H-358細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞
Human Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1975細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、H-1876細(xì)胞
H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV1細(xì)胞、HT55細(xì)胞、NL20細(xì)胞
PaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera-2D1細(xì)胞、118MG細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞
NKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-SVEC01細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞
Mono Mac 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoN細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞
MB-49細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT29細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞、UC-3細(xì)胞
PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1694細(xì)胞、hEEC細(xì)胞、HCT116細(xì)胞
KYSE410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞、WPE-int細(xì)胞
IAR-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞、BE(2)-M17細(xì)胞
NRK 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA205細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞
X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH211細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞
A2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-480細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞、A7r5細(xì)胞
MC26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-274-T細(xì)胞、TW 01細(xì)胞、HC-11細(xì)胞
2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞
HRVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCK-81細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞、L-6細(xì)胞
TCC Sup細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞
KALS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH209細(xì)胞、2BS細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma細(xì)胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞
Hs 695.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC6細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞
NHRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341 Med細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞
SNU407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL6細(xì)胞、SNU251細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞
GDM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7-GFP細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞
MCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞
Ramos 2G6 4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-04-03細(xì)胞、TE-85細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞
KP-N-RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML3細(xì)胞、KAT5細(xì)胞、578T細(xì)胞
HCC94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2218細(xì)胞、AN-3細(xì)胞、H2227細(xì)胞
H-735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞
SUM 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA415細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞
P3HRI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL I細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞、MDST8細(xì)胞
P30/Ohkubo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 433細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞
HOP-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK2細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞、T24細(xì)胞
GBCSD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx2細(xì)胞、IGROV細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞
VMRCRCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)-C細(xì)胞、SL1細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞
HCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞、EB-3細(xì)胞
COLO-320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-12細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞
MESSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞
Colo699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞、B16F0細(xì)胞
MCF 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細(xì)胞、PK13細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞
3T3-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞
VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO 11細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、M-07e細(xì)胞
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