"KMB-17 Cell:人二倍體細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
SUD6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1623細(xì)胞、RCS細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞
P3.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ect1/E6E7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、H446細(xì)胞
TNC-1B12B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞
RH35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs606T細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞、HCE-T細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
KMB-17 Cell:人二倍體細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中相關(guān)問(wèn)題總結(jié)：懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái)，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過(guò)高之轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡；細(xì)胞之接種密度為何？依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)之一重要原因；細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級(jí)和無(wú)菌過(guò)濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級(jí)，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無(wú)菌狀況，次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過(guò)濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細(xì)胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-２０°C不可超過(guò)１小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細(xì)胞欲冷凍保存時(shí)，細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度？冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細(xì)胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí)，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)７２小時(shí))；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
IGROV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDF-a細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞
3T3F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞、NWA細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
Hep-G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞
SW-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L51細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞、SW1088細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
KMB-17 Cell:人二倍體細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí)，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō)，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
CHL-IU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812-F細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞、QGY-7703細(xì)胞
HL60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Farage細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞
MOLT-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKBML細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞
A 172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A427細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞
IPLB-Sf21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-2008細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞
P3/X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞
NCI-H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1048細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞
KMB-17 Cell:人二倍體細(xì)胞系
GC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞
MDA MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-G63細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞
Hs840_T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC002細(xì)胞、578T細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞
H-1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98G細(xì)胞、P116細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞
ES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML5細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞
WEHI 164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-OA細(xì)胞、H-250細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞
HCC4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT-5細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞、H-1184細(xì)胞
HFLS-OA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF-1細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞、COV 434細(xì)胞
BTI-TN5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞
BTI-TN5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞
Hepatoma-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H522細(xì)胞、Colo320細(xì)胞、B-104細(xì)胞
SW1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-GEO細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞
PaTu-8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305-C細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞、SCC154細(xì)胞
SHG 44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD-LM-2細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞
U343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM-Jurkat細(xì)胞、RPMI 1788細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞
VK2 (E6/E7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320細(xì)胞、GM0637細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞
WRL68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283細(xì)胞、H-2107細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞
M619細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞
Eca 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910/PM細(xì)胞、PC 12細(xì)胞、SNU869細(xì)胞
NCI-H322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-T4細(xì)胞、MCA205細(xì)胞、BT 20細(xì)胞
NCI-H322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-T4細(xì)胞、MCA205細(xì)胞、BT 20細(xì)胞
VMM5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CX-1細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞、7860細(xì)胞
GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞
HS 445T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA.MB.435細(xì)胞、PK15細(xì)胞、L-cells細(xì)胞
H-1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：5637細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞
NCTC 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02.03細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞
P3X63 Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2291細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞
HIT.T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M3 Clone M-3細(xì)胞、H7721細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞
NTera2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK13細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞
Hs-611-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-202細(xì)胞、H-1618細(xì)胞、Sol8細(xì)胞
SCL-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C41細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞
ECC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 Swiss Albino細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞、H2126細(xì)胞
H69/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞
HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞
GM05372E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU423細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞
LS 174 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL2細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞、MPP89細(xì)胞
QBC939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA-19細(xì)胞、TE9細(xì)胞、C518細(xì)胞
Panc10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUGCHOR1細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞
Panc10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUGCHOR1細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞
OCI-Ly01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞
HEK-293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞
KMB-17 Cell:人二倍體細(xì)胞系
SU86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2D1細(xì)胞、BIC細(xì)胞、H-1435細(xì)胞
BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細(xì)胞、DLD1細(xì)胞、LA4細(xì)胞
HT55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159PT細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞、ML-2細(xì)胞
SMA 560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II細(xì)胞、H2444細(xì)胞、I90細(xì)胞
M-1 myeloid leukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H69細(xì)胞、H69/P細(xì)胞、RAT2細(xì)胞
NK-92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT1細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞
TOV-21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22-H8D8細(xì)胞、H865細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞
H 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細(xì)胞、RKO細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞
Hs746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細(xì)胞、TE-6細(xì)胞、U-87細(xì)胞
MDAMB175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FCCH1018細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞、H292細(xì)胞
CP-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97-H細(xì)胞、M-14細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞
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