抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-CD45/B220
中文名稱 白細(xì)胞共同抗原抗體
別 名 B220; CD 45; GP180; L CA; LCA; Leukocyte common antigen; LY5; Protein tyrosine phosphatase receptor type C; Protein tyrosine phosphatase receptor type c polypeptide; protein tyrosine phosphatase, receptor type, C; PTPRC; SCID due to PTPRC deficiency; T200; T200 glycoprotein.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Dog, Pig, Cow, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞表面分子 淋巴細(xì)胞 t-淋巴細(xì)胞 b-淋巴細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 137kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CD45/B220
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是白細(xì)胞共同抗原抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
熱土厭氧棒菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
石油棲熱腔菌培養(yǎng),ATCC菌株
食氨基酸脫硫弧菌保存,ATCC菌株
產(chǎn)纖維二糖梭菌售價(jià),ATCC菌株
白蟻梭菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
馬瑞氏熱厭氧桿菌培養(yǎng),ATCC菌株
夾膜紅細(xì)菌保存,ATCC菌株
類球紅細(xì)菌售價(jià),ATCC菌株
肪合酶(FASN)ELISA Kit for Fatty Acid Synthase (FASN)規(guī)格:48T/96T
乳鐵傳遞蛋白(LTF)ELISA Kit for Lactoferrin (LTF)規(guī)格:48T/96T
尿皮質(zhì)素3(UCN3)ELISA Kit for Urocortin 3 (UCN3)規(guī)格:48T/96T
去唾液糖蛋白受體2(ASGR2)ELISA Kit for Asialoglycoprotein Receptor 2 (ASGR2)規(guī)格:48T/96T
白細(xì)胞衍生趨化因子1(LECT1)ELISA Kit for Leukocyte Cell Derived Chemotaxin 1 (LECT1)規(guī)格:48T/96T
CD5抗原樣蛋白(CD5L)ELISA Kit for CD5 Antigen Like Protein (CD5L)規(guī)格:48T/96T
胰高血糖素樣肽1(GLP1)ELISA Kit for Glucagon Like Peptide 1 (GLP1)規(guī)格:48T/96T
間皮素(MSLN)ELISA Kit for Mesothelin (MSLN)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)ELISA Kit for Neuronal Pentraxin II (NPTX2)規(guī)格:48T/96T
肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶1B(CPT1B)ELISA Kit for Carnitine Palmitoyltransferase 1B, Muscle (CPT1B)規(guī)格:48T/96T
精/絲豐富剪接因子2(SRSF2)ELISA Kit for Serine/Arginine Rich Splicing Factor 2 (SRSF2)規(guī)格:48T/96T
核受體亞家族1D組成員2(NR1D2)ELISA Kit for Nuclear Receptor Subfamily 1, Group D, Member 2 (NR1D2)規(guī)格:48T/96T
半乳糖轉(zhuǎn)移酶7亞基β1,4抗體Hesperetin中文名:橙皮素別名:分子式:C16H14O6
Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體Robtin中文名:別名:分子式:C15H12O6
組蛋白相關(guān)Bmi1抗體Anisofolin A中文名:別名:分子式:C39H32O14
溴脫氧尿苷單克隆抗體(增殖標(biāo)志物)3',4',7-Trimethoxyflavan中文名:別名:分子式:C18H20O4
腦特定蛋白Brn3B抗體Luteolin 7-O-glucoside中文名:木犀草苷別名:Cynaroside分子式:C21H20O11
白細(xì)胞共同抗原抗體 morganella morganii種屬:morganella morganii
提供形式:凍干粉
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。
生長(zhǎng)條件:30℃,好氧,24h摩氏摩根菌