抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-CEA/CD66e/CEACAM5
中文名稱 癌胚抗原抗體
別 名 Carcino Embryonic Antigen CEA; CEACAM 5; CEACAM-5; Carcinoembryonic antigen; Carcinoembryonic antigen related cell adhesion molecule 5; CD66e; CD66e antigen; CEA; CEACAM5; DKFZp781M2392; Meconium antigen 100.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Mouse
克隆類型 monoclonal
交叉反應(yīng) Human
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 干細胞 細胞類型標志物 腫瘤細胞生物標志物
蛋白分子量 predicted molecular weight: 150-200kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from Human CEA/CD66e/CEACAM5
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是癌胚抗原抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
灰葡萄孢現(xiàn)貨,ATCC菌株
溫特曲霉培養(yǎng),ATCC菌株
棲土曲霉保存,ATCC菌株
醬油曲霉售價,ATCC菌株
寄生曲霉現(xiàn)貨,ATCC菌株
嗜熱鏈霉菌培養(yǎng),ATCC菌株
華美鏈霉菌保存,ATCC菌株
玫瑰色鏈霉菌售價,ATCC菌株
載蛋白A2(APOA2)ELISA Kit for Apolipoprotein A2 (APOA2)規(guī)格:48T/96T
10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP10)ELISA Kit for Interferon Gamma Induced Protein 10kDa (IP10)規(guī)格:48T/96T
蛋白S(PROS)ELISA Kit for Protein S (PROS)規(guī)格:48T/96T
嗜鉻蛋白A(CHGA)ELISA Kit for Chromogranin A (CHGA)規(guī)格:48T/96T
一合酶相互作用蛋白(NOSIP)ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase Interacting Protein (NOSIP)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)ELISA Kit for Neurotrophin 3 (NT3)規(guī)格:48T/96T
聚集蛋白聚糖(AGC)ELISA Kit for Aggrecan (AGC)規(guī)格:48T/96T
叉頭框蛋白M1(FOXM1)ELISA Kit for Forkhead Box Protein M1 (FOXM1)規(guī)格:48T/96T
蛋白激酶Cδ(PKCδ)ELISA Kit for Protein Kinase C Delta (PKCd)規(guī)格:48T/96T
紅細胞生成素(EPO)ELISA Kit for Erythropoietin (EPO)規(guī)格:48T/96T
補體因子B(CFB)ELISA Kit for Complement Factor B (CFB)規(guī)格:48T/96T
轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)ELISA Kit for Transforming Growth Factor Alpha (TGFa)規(guī)格:48T/96T
殺菌通透性增加蛋白樣1抗體Larixinol中文名:別名:Abiesinol E分子式:C30H22O10
殺菌/通透性增加蛋白樣2抗體5-Deoxycajanin中文名:別名:2',4'-Dihydroxy-7-methoxyisoflavone分子式:C16H12O5
嗜乳脂蛋白樣3抗體Epimedokoreanin B中文名:別名:8,5'-Diprenylluteolin分子式:C25H26O6
殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體Skullcapflavone I中文名:別名:分子式:C17H14O6
BRD1蛋白抗體Quercetin 3,4'-dimethyl ether中文名:槲皮素-3,4'-二甲醚別名:分子式:C17H14O7
癌胚抗原抗體 Staphylococcus saprophyticus subsp. saprophyticus種屬:Staphylococcus saprophyticus subsp. saprophyticus
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長條件:37℃,好氧
存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法腐生葡萄球菌腐生亞種