抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-beta endorphin
中文名稱 β-內(nèi)啡肽/β endorphin抗體
別 名 β-Endorphin; beta endorphin; βendorphin; beta endorfin; Beta endorphin; Corticotropin lipotropin; POMC; Proopiomelanocortin; COLI_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Cow, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 內(nèi)分泌病
蛋白分子量 predicted molecular weight: 4.5kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human beta endorphin (237-267aa)
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是β-內(nèi)啡肽/β endorphin抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
蘇云金芽孢桿菌猝倒亞種現(xiàn)貨,ATCC菌株
蘇云金芽孢桿菌戈爾斯德變種培養(yǎng),ATCC菌株
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種保存,ATCC菌株
枯草芽孢桿菌深黑變種售價,ATCC菌株
塵埃芽孢桿菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
日本根霉培養(yǎng),ATCC菌株
側(cè)耳保存,ATCC菌株
黃萎輪枝孢售價,ATCC菌株
CD14分子(CD14)ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 14 (CD14)規(guī)格:48T/96T
接觸蛋白2(CNTN2)ELISA Kit for Contactin 2 (CNTN2)規(guī)格:48T/96T
毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變因子(ATM)ELISA Kit for Ataxia Telangiectasia Mutated (ATM)規(guī)格:48T/96T
半乳糖苷酶β(GLβ)ELISA Kit for Galactosidase Beta (GLb)規(guī)格:48T/96T
殺傷細(xì)胞凝集素樣受體亞家族A成員1(KLRA1)ELISA Kit for Killer Cell Lectin Like Receptor Subfamily A, Member 1 (KLRA1)規(guī)格:48T/96T
溶酶體關(guān)聯(lián)膜蛋白2(LAMP2)ELISA Kit for Lysosomal Associated Membrane Protein 2 (LAMP2)規(guī)格:48T/96T
胰高血糖素(GC)ELISA Kit for Glucagon (GC)規(guī)格:48T/96T
透明質(zhì)結(jié)合蛋白1(HABP1)ELISA Kit for Hyaluronan Binding Protein 1 (HABP1)規(guī)格:48T/96T
肝素結(jié)合性表皮生長因子(HBEGF)ELISA Kit for Heparin Binding Epidermal Growth Factor Like Growth Factor (HBEGF)規(guī)格:48T/96T
天冬轉(zhuǎn)酶(AST)ELISA Kit for Aspartate Aminotransferase (AST)規(guī)格:48T/96T
山梨醇脫酶(SDH)ELISA Kit for Sorbitol Dehydrogenase (SDH)規(guī)格:48T/96T
絲蛋白酶1(PRSS1)ELISA Kit for Protease, Serine 1 (PRSS1)規(guī)格:48T/96T
磷酸化上皮鈣粘附分子抗體Isochandalone中文名:別名:分子式:C25H24O5
BRD2蛋白抗體8-Prenylluteone中文名:別名:分子式:C25H26O6
BRD3蛋白抗體Dehydrodeguelin中文名:脫氫魚藤素別名:去氫魚藤素分子式:C23H20O6
磷酸化酪氨酸蛋白激酶6/乳腺腫瘤激酶抗體Persicoside中文名:別名:分子式:C23H26O11
磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體Cedeodarin中文名:別名:分子式:C16H14O7
β-內(nèi)啡肽/β endorphin抗體 Fusarium solani種屬:Fusarium solani
提供形式:僅提供斜面
安全等級:2
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:馬鈴薯、葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基:(PDA):馬鈴薯提取液 1.0L,葡萄糖 20.0g,瓊脂 15.0g,pH自然。[注] 馬鈴薯提取液:取去皮馬鈴薯200g,切成小塊,加水1.0L煮沸30min,濾去馬鈴薯塊,將濾液補(bǔ)足至1.0L。
傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件:24℃,好氧
存儲條件:2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個月。腐皮鐮孢(斜面)