抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-BK channel
中文名稱 鈣激活鉀通道蛋白 α 1抗體
別 名 Maxi Potassium channel alpha; bA205K10.1; BK channel; BKCa channels; BKCA alpha; BKCA alpha subunit; BKTM; Calcium activated potassium channel subfamily M subunit alpha 1; Calcium activated potassium channel subunit alpha 1; DKFZp686K1437; Drosophila slowpoke like; hSlo; K(VCA)alpha; KCa1.1; KCNMA 1; KCNMA; KCNMA1; Large conductance calcium activated potassium channel subfamily M alpha member 1; Maxi K; Maxi K channel; MaxiK; Potassium large conductance calcium activated channel subfamily M alpha member 1; SAKCA; Slo 1; SLO alpha; SLO; Slo homolog; Slo1; Slowpoke homolog; Stretch activated Kca channel; KCMA1_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 通道蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 137kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BK channel (1120-1165aa)
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是鈣激活鉀通道蛋白 α 1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
丙酮丁醇梭菌(丙酮丁醇桿菌)現(xiàn)貨,ATCC菌株
痤瘡丙酸桿菌培養(yǎng),ATCC菌株
生孢梭菌(產(chǎn)芽孢梭狀芽孢桿菌)保存,ATCC菌株
干酪乳桿菌干酪亞種售價(jià),ATCC菌株
巴氏醋桿菌巴氏亞種現(xiàn)貨,ATCC菌株
瑞士乳桿菌培養(yǎng),ATCC菌株
乳鏈球菌保存,ATCC菌株
德氏乳桿菌保加利亞亞種售價(jià),ATCC菌株
跨膜4域亞家族A成員1(MS4A1)ELISA Kit for Membrane Spanning 4 Domains Subfamily A, Member 1 (MS4A1)規(guī)格:48T/96T
前列腺凋亡應(yīng)答因子4(PAR4)ELISA Kit for Prostate Apoptosis Response 4 (PAR4)規(guī)格:48T/96T
肌球蛋白重鏈6(MYH6)ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 6, Cardiac Muscle, Alpha (MYH6)規(guī)格:48T/96T
G蛋白偶聯(lián)受體78(GPR78)ELISA Kit for G Protein Coupled Receptor 78 (GPR78)規(guī)格:48T/96T
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)ELISA Kit for Topoisomerase II (TOP2)規(guī)格:48T/96T
核連蛋白1(NUCB1)ELISA Kit for Nucleobindin 1 (NUCB1)規(guī)格:48T/96T
11-β-羥基類固醇脫酶3(HSD11β3)ELISA Kit for 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD11b3)規(guī)格:48T/96T
肝細(xì)胞核因子1β(HNF1β)ELISA Kit for Hepatocyte Nuclear Factor 1 Beta (HNF1b)規(guī)格:48T/96T
復(fù)制蛋白A1(RPA1)ELISA Kit for Replication Protein A1 (RPA1)規(guī)格:48T/96T
Smoothelin蛋白(SMTN)ELISA Kit for Smoothelin (SMTN)規(guī)格:48T/96T
雙調(diào)蛋白(AREG)ELISA Kit for Amphiregulin (AREG)規(guī)格:48T/96T
粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF)ELISA Kit for Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte Macrophage (GMCSF)規(guī)格:48T/96T
磷酸化促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體Isoerysenegalensein E中文名:別名:分子式:C25H26O6
B淋巴細(xì)胞特異性激活OCT結(jié)合蛋白1抗體8-Prenylnaringenin中文名:8-異戊烯基柚皮素別名:分子式:C20H20O5
核糖體合成蛋白BOP1抗體Auriculasin中文名:別名:分子式:C25H24O6
調(diào)節(jié)中心體分離早期相關(guān)激酶BORA抗體8-Demethylsideroxylin中文名:別名:分子式:C17H14O5
萊姆病螺旋體抗體Syzalterin中文名:別名:6,8-Dimethylapigenin分子式:C17H14O5
鈣激活鉀通道蛋白 α 1抗體 Aeromonas sobria種屬:Aeromonas sobria
分離基物:魚
提供形式:凍干粉
安全等級:1
模式菌株:yes
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長條件:30℃,好氧溫和氣單胞菌