抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-BNIP2
中文名稱 Bcl2相互作用蛋白2抗體
別 名 NIP2; BCL2/adenovirus E1B 19 kDa protein interacting protein 2; BCL2/adenovirus E1B 19kDa interacting protein 2; BNIP 2.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 36kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BNIP2
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是Bcl2相互作用蛋白2抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
產(chǎn)氣莢膜梭菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
食油假單胞菌培養(yǎng),ATCC菌株
弗氏檸檬酸桿菌保存,ATCC菌株
嗜熱脂肪芽孢桿菌售價,ATCC菌株
乙酸鈣不動桿菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
土壤伯克氏菌培養(yǎng),ATCC菌株
短乳桿菌保存,ATCC菌株
地衣形芽孢桿菌售價,ATCC菌株
白介素1受體Ⅰ(IL1R1)ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Type I (IL1R1)規(guī)格:48T/96T
腎損傷分子1(Kim1)ELISA Kit for Kidney Injury Molecule 1 (Kim1)規(guī)格:48T/96T
尾加壓素2受體(UTS2R)ELISA Kit for Urotensin 2 Receptor (UTS2R)規(guī)格:48T/96T
P選擇素(SELP)ELISA Kit for Selectin, Platelet (SELP)規(guī)格:48T/96T
基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)規(guī)格:48T/96T
白介素12A(IL12A)ELISA Kit for Interleukin 12A (IL12A)規(guī)格:48T/96T
干細(xì)胞因子(SCF)ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF)規(guī)格:48T/96T
中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(ELA2)ELISA Kit for Elastase 2, Neutrophil (ELA2)規(guī)格:48T/96T
內(nèi)皮素1(EDN1)ELISA Kit for Endothelin 1 (EDN1)規(guī)格:48T/96T
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3)規(guī)格:48T/96T
血管生成素2(ANGPT2)ELISA Kit for Angiopoietin 2 (ANGPT2)規(guī)格:48T/96T
血管內(nèi)皮生長因子B(VEGFB)ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor B (VEGFB)規(guī)格:48T/96T
紅細(xì)胞腺苷脫氨酶3抗體Pinobanksin 5-methyl ether中文名:短葉松素-5-甲醚別名:5-O-Methylpinobanksin分子式:C16H14O5
星形膠質(zhì)細(xì)胞抗體Quercetin 3,3'-dimethyl ether中文名:槲皮素-3,3′-二甲醚; 5,7,4′-三羥基-3,3′-二甲氧基黃酮別名:3,3'-Di-O-methylquercetin; 5,7,4'-Trihydroxy-3,3'-dimethoxyflavone分子式:C17H14O7
醛縮酶A抗體Retusin中文名:別名:5-Hydroxy-3,7,3',4'-tetramethoxyflavone分子式:C19H18O7
雄激素結(jié)合蛋白抗體6,4'-Dihydroxy-7-methoxyflavanone中文名:6,4'-二羥基-7-甲氧基二氫黃酮別名:分子式:C16H14O5
肝再生增強(qiáng)因子抗體Axillarin中文名:槲皮萬壽菊素-3,6-二甲醚別名:Quercetagetin 3,6-dimethyl ether分子式:C17H14O8
Bcl2相互作用蛋白2抗體 Clostridium│swellfunianum sp. nov.種屬:Clostridium│swellfunianum sp. nov.
分離基物:窖泥
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:yes
應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)乙酸、乙醇、己酸、氫氣、二氧化碳;降解乳酸。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0999
生長條件:37℃
存儲條件:其他水井坊梭菌