抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-BNIP1/TRG8
中文名稱 Bcl2相互作用蛋白1抗體(轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白)
別 名 NIP1; BCL2 adenovirus E1B 19kD interacting protein 1; BCL2/adenovirus E1B 19 kDa protein-interacting protein 1; BNIP1; sec20; SEC20_HUMAN; SEC20L; Transformation-related gene 8 protein; TRG-8; TRG8; Vesicle transport protein SEC20.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 26kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BNIP1/TRG8
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是Bcl2相互作用蛋白1抗體(轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白) 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
Bacillusdrentensis現(xiàn)貨,ATCC菌株
Bacillusnovalis培養(yǎng),ATCC菌株
粗糙脈孢菌保存,ATCC菌株
北京棒桿菌售價,ATCC菌株
煙酸芽孢桿菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
綠針假單胞菌培養(yǎng),ATCC菌株
副溶血性弧菌保存,ATCC菌株
腐敗希瓦氏菌售價,ATCC菌株
肽基脯酰異構(gòu)酶E(PPIE)ELISA Kit for Peptidylprolyl Isomerase E (PPIE)規(guī)格:48T/96T
前列腺抑制肽(PIP)ELISA Kit for Prostatic Inhibin Peptide (PIP)規(guī)格:48T/96T
肌球蛋白重鏈1(MYH1)ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 1, Skeletal Muscle, Adult (MYH1)規(guī)格:48T/96T
Ⅲ型前膠原羧基端原肽(PⅢCP)ELISA Kit for Procollagen III C-Terminal Propeptide (PIIICP)規(guī)格:48T/96T
基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2)規(guī)格:48T/96T
血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR1)ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1 (VEGFR1)規(guī)格:48T/96T
干擾素ω(IFNω)ELISA Kit for Interferon Omega (IFNw)規(guī)格:48T/96T
白介素2受體β(IL2Rβ)ELISA Kit for Interleukin 2 Receptor Beta (IL2Rb)規(guī)格:48T/96T
孕受體(PGR)ELISA Kit for Progesterone Receptor (PGR)規(guī)格:48T/96T
癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)ELISA Kit for Oncoprotein Induced Transcript 3 (OIT3)規(guī)格:48T/96T
白介素2受體α(IL2Rα)ELISA Kit for Interleukin 2 Receptor Alpha (IL2Ra)規(guī)格:48T/96T
成纖維細(xì)胞生長因子10(FGF10)ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 10 (FGF10)規(guī)格:48T/96T
芳基硫酸酯酶A抗體Ambocin中文名:染料木素-7-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷別名:Genistein 7-O-β-D-apiofuranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside分子式:C26H28O14
植物延長蛋白(擬南芥)(-)-Sativan中文名:別名:分子式:C17H18O4
擬南芥ACA11抗體7,3',4'-Tri-O-methyleriodictyol中文名:5-羥基-7,3',4'-三甲氧基二氫黃酮別名:5-Hydroxy-7,3',4'-trimethoxyflavanone分子式:C18H18O6
AHA3抗體(擬南芥)Alpinone 3-acetate中文名:別名:Alpinone 3-O-acetate分子式:C18H16O6
A-Raf抗體Afzelechin 3-O-xyloside中文名:阿夫兒茶精-3-O-木糖苷別名:分子式:C20H22O9
Bcl2相互作用蛋白1抗體(轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白) Morchella sp.種屬:Morchella sp.
提供形式:斜面培養(yǎng)物/凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:研究;生產(chǎn)。食用。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。
傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件:25℃,好氧。
生長特性8天長滿斜面,菌絲灰白色、稀疏。
存儲條件:2-8℃冷藏羊肚菌屬(斜面)