抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-alpha Actinin 4-Loading Control
中文名稱 α-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體
別 名 Actinin alpha 4; alpha-Actinin 4; alpha Actinin-4; actinin 4; actinin4; actinin-4; ACTN 4; ACTN4; DKFZp686K23158; F actin cross linking protein; FSGS 1; FSGS; FSGS1; Non muscle alpha actinin 4.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗 內(nèi)參抗體
研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 結(jié)合蛋白 細(xì)胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 105kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Actinin alpha 4 (861-911aa)
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
下列是α-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
木層孔菌 Phellinussp.
炭球菌 Dildiniaconcentrica(Bolt.:Fr.)Ces&deNot
南方樹(shù)舌 Ganodermaaustrale(Fr.)Pat
嬰兒雙歧桿菌 Bifidobacteriuminfantisreuter
雅致放射毛霉=葡匐放射毛霉 Actinomucorelegans(Eidam)BenjiminetHesseltine=ActinomucorrepensSchostakowisch
普雷恩毛霉 Mucor prainii Chodat et Nechitch
立枯多核菌 Rhizoctoniasolani
紫褐小單孢菌 Micromonospora violaceofusca
壯觀鏈霉菌 Streptomyces spectabilis
筑波鏈霉菌 Streptomyces tsukubaensis
中間α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H5 (ITIH5)規(guī)格:48T/96T
血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶7(ADAMTS7)ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 7 (ADAMTS7)規(guī)格:48T/96T
腎足蛋白(NPHN)ELISA Kit for Nephrin (NPHN)規(guī)格:48T/96T
補(bǔ)體成分1q子成分A(C1qA)ELISA Kit for Complement Component 1, Q Subcomponent A (C1qA)規(guī)格:48T/96T
衰老關(guān)鍵蛋白2(FBLN2)ELISA Kit for Fibulin 2 (FBLN2)規(guī)格:48T/96T
胰島素降解酶(IDE)ELISA Kit for Insulin Degrading Enzyme (IDE)規(guī)格:48T/96T
生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2(Grb2)ELISA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 2 (Grb2)規(guī)格:48T/96T
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶π1(GSTπ1)ELISA Kit for Glutathione S Transferase Pi (GSTp)規(guī)格:48T/96T
彈性蛋白酶3B(ELA3B)ELISA Kit for Elastase 3B (ELA3B)規(guī)格:48T/96T
解整合素金屬蛋白酶33(ADAM33)ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 33 (ADAM33)規(guī)格:48T/96T
波形蛋白(VIM)ELISA Kit for Vimentin (VIM)規(guī)格:48T/96T
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框85(C1orf85)ELISA Kit for Chromosome 1 Open Reading Frame 85 (C1orf85)規(guī)格:48T/96T
中心體蛋白AZI1抗體N-(2-Hydroxy-4-methoxyphenyl)acetamide中文名:別名:分子式:C9H11NO3
ADCK5蛋白抗體Rauvotetraphylline A中文名:別名:分子式:C20H26N2O3
細(xì)胞分裂周期蛋白5抗體Periglaucine B中文名:別名:分子式:C20H23NO6
β淀粉樣肽/Aβ42抗體2,7-Dihydroxy-2H-1,4-benzoxazin-3(4H)-one中文名:別名:DHBOA; 2,7-Dihydroxy-1,4-benzoxazin-3-one分子式:C8H7NO4
ADCK4蛋白抗體Sarpagine中文名:別名:分子式:C19H22N2O2
α-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體 Eupenicillium│ochrosalmoneum種屬:Eupenicillium│ochrosalmoneum
分離基物:玉米粉
提供形式:凍干物
安全等級(jí):1
模式菌株:yes
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0072
生長(zhǎng)條件:25℃
存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法赭鮭色正青霉