"Fao細胞：小鼠肝癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯誤；冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心；懸渾細胞誤認為死細胞；培養(yǎng)溫度使用錯誤；細胞置于-８０℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機轉軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機每分鐘的轉數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前，細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細胞內(nèi)部空間結構紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內(nèi)結構成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分，減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提高細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少胞內(nèi)形成冰結晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
KE37細胞系相關產(chǎn)品：H2107細胞、J111細胞、M14細胞
HME-1細胞系相關產(chǎn)品：ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞
NCI-H1693細胞系相關產(chǎn)品：MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞
LS 1034細胞系相關產(chǎn)品：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞
Line 522細胞系相關產(chǎn)品：H4IIEC3細胞、F442-A細胞、hMSC-BM細胞
HuLEC-5a細胞系相關產(chǎn)品：AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
HFL細胞系相關產(chǎn)品：HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
UM-UC-3細胞系相關產(chǎn)品：16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞
NRK clone 49F細胞系相關產(chǎn)品：H322T細胞、OVCA-420細胞、OE21細胞
SKG3A細胞系相關產(chǎn)品：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞
B6Tert-1細胞系相關產(chǎn)品：CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞
MDAMB436細胞系相關產(chǎn)品：SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
OCI-LY-19細胞系相關產(chǎn)品：CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞
BV-173細胞系相關產(chǎn)品：Hs 940.T細胞、Mv1.Lu細胞、H676細胞
BTI-Tn-5B1-4細胞系相關產(chǎn)品：RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞
LAD2細胞系相關產(chǎn)品：IPEC-1細胞、RGB細胞、WERIRb1細胞
LAD2細胞系相關產(chǎn)品：IPEC-1細胞、RGB細胞、WERIRb1細胞
MFHL-2細胞系相關產(chǎn)品：Normal fibroblast-10細胞、KLN205細胞、H-2198細胞
MKN 28細胞系相關產(chǎn)品：AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞
KYSE-510細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
HCC1438細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE-2細胞、OVCA-433細胞、A-673細胞
HEL-299細胞系相關產(chǎn)品：EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞
RD-ES細胞系相關產(chǎn)品：BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞
MALME.3M細胞系相關產(chǎn)品：P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞
PA I細胞系相關產(chǎn)品：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
SKHEP1細胞系相關產(chǎn)品：Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
V-79-4細胞系相關產(chǎn)品：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞
NT2細胞系相關產(chǎn)品：T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞
OCI-Ly 1細胞系相關產(chǎn)品：TE8細胞、RGCs細胞、A549 ATCC細胞
NCI.H226細胞系相關產(chǎn)品：HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
HMEC細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)-M17細胞、SKGT4細胞、QGP 1細胞
HIEC-6細胞系相關產(chǎn)品：GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞
U-266細胞系相關產(chǎn)品：EA.hy 926細胞、NCI H508細胞、HCC-1500細胞
SCL2細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、4175細胞、TFK-1細胞
SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品：AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞
KASUMI1細胞系相關產(chǎn)品：9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞
SUDHL6細胞系相關產(chǎn)品：H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞
CESS細胞系相關產(chǎn)品：EFM-19細胞、B16 melanoma細胞、CaSki細胞
L363細胞系相關產(chǎn)品：alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞
IMCD3細胞系相關產(chǎn)品：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞
OCILY-3細胞系相關產(chǎn)品：Hs 888Lu細胞、Walker/LLC-WRC256細胞、P3X63 Ag8.653細胞
NCI-H295細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞
U2OS細胞系相關產(chǎn)品：Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
WM-239-A細胞系相關產(chǎn)品：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞
A549-Taxol細胞系相關產(chǎn)品：MLM細胞、KYSE410細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞
NPC-TW 01細胞系相關產(chǎn)品：SK-OV-3細胞、V79-4細胞、BLO11細胞
V 79-4細胞系相關產(chǎn)品：FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
OC-316細胞系相關產(chǎn)品：ZR75_1細胞、HT-115細胞、alpha-TC1.6細胞
SKMEL24細胞系相關產(chǎn)品：32D clone 3細胞、UMNSAH/DF-1細胞、RGC6細胞
H-2444細胞系相關產(chǎn)品：CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞
HBMEC細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞
PCI-SG231細胞系相關產(chǎn)品：HT1376細胞、DU-145細胞、DF1細胞
JM-1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞
HuPT4細胞系相關產(chǎn)品：MC-38細胞、Loucy細胞、SJSA1細胞
Kit225/K6細胞系相關產(chǎn)品：J111細胞、GM00215細胞、OCI-AML4細胞
HH [Human lymphoma]細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1184細胞、H-1882細胞、C2A細胞
P31/Fujioka細胞系相關產(chǎn)品：B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞
H889細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
MonoMac6細胞系相關產(chǎn)品：DMS53細胞、SUM190細胞、NCI-H810細胞
NCI-H220細胞系相關產(chǎn)品：HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞
M059J細胞系相關產(chǎn)品：Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞
Ramos-2G6-4C10細胞系相關產(chǎn)品：BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞
TSU-Pr1細胞系相關產(chǎn)品：H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關產(chǎn)品：Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
SuDHL 1細胞系相關產(chǎn)品：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
HCC0015細胞系相關產(chǎn)品：COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
ASH3細胞系相關產(chǎn)品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞
Glioma-261細胞系相關產(chǎn)品：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
CL1.0細胞系相關產(chǎn)品：COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
RT4細胞系相關產(chǎn)品：U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞
TGW-nu-1細胞系相關產(chǎn)品：Hep2細胞、FLC-7細胞、SK 1細胞
CCC-HEL-1細胞系相關產(chǎn)品：SF763細胞、HOC細胞、NIH 3T3細胞
NCI-H1693細胞系相關產(chǎn)品：MARC 145細胞、SNU-C2B細胞、NS653細胞
SK-SH-SY5Y細胞系相關產(chǎn)品：Mel-MeWo細胞、EB2細胞、HPB/ALL細胞
"