"NCI-H524細胞：人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：該細胞１９８２年建系，源自非小細胞肺癌男性患者的轉移淋巴結。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：懸浮生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因導入細胞內(nèi)，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
SK-MES細胞系相關產(chǎn)品：624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞系相關產(chǎn)品：HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞
RGE細胞系相關產(chǎn)品：Hs 683.T細胞、L615細胞、NOZC-1細胞
H1184細胞系相關產(chǎn)品：OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞
Leukemia 1210細胞系相關產(chǎn)品：293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞
HEL 92.1.7細胞系相關產(chǎn)品：MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
Hs 934.T細胞系相關產(chǎn)品：MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞
P3.NS-1/1.Ag4.1細胞系相關產(chǎn)品：BJAB細胞、SKUT1細胞、B16F1細胞
Panc_04_03細胞系相關產(chǎn)品：YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞
bEND.3細胞系相關產(chǎn)品：ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
COLO-16細胞系相關產(chǎn)品：OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞
32D.cl3細胞系相關產(chǎn)品：Mouse Podocyte Clone-5細胞、LS-411N細胞、QBC939細胞
NPA細胞系相關產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
MXI細胞系相關產(chǎn)品：Earles's cells細胞、HET-1A細胞、HepG2-luc細胞
BMF細胞系相關產(chǎn)品：TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞
SF 539細胞系相關產(chǎn)品：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
SF 539細胞系相關產(chǎn)品：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
OCI-Ly3細胞系相關產(chǎn)品：C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞
WiDr細胞系相關產(chǎn)品：HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞
CCD-18Co細胞系相關產(chǎn)品：TW 01細胞、NCI-157細胞、A2780 CP70細胞
BT-325細胞系相關產(chǎn)品：SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞
KYSE-410細胞系相關產(chǎn)品：TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞
NUGC3細胞系相關產(chǎn)品：VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞
LLC-PK(1)細胞系相關產(chǎn)品：Murine Leydig Tumor細胞：-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞
LAPC-4細胞系相關產(chǎn)品：MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞
MDA134細胞系相關產(chǎn)品：RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞
U266B1細胞系相關產(chǎn)品：OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞
GM 637細胞系相關產(chǎn)品：TALL 1細胞、MV-1-Lu細胞、HCT15細胞
H-64細胞系相關產(chǎn)品：IOSE-80細胞、RDES細胞、HPASMC細胞
KMS-11細胞系相關產(chǎn)品：NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞
G-Olig2細胞系相關產(chǎn)品：C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞
PC 61 5.3細胞系相關產(chǎn)品：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
HUVSMC細胞系相關產(chǎn)品：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
MUM2B細胞系相關產(chǎn)品：EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
SK-UT-1細胞系相關產(chǎn)品：TE-14細胞、3-LL細胞、HPAEpiC細胞
RPMI #8226細胞系相關產(chǎn)品：He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞
BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
SKMEL-24細胞系相關產(chǎn)品：MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞
L-6 myoblast細胞系相關產(chǎn)品：P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
HOS-143B細胞系相關產(chǎn)品：DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞
KM933細胞系相關產(chǎn)品：Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
118 MG細胞系相關產(chǎn)品：HNE3細胞、LK-2細胞、B16/F10細胞
MRC-9細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞
HSC-4細胞系相關產(chǎn)品：RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞
RM1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
DHL-8細胞系相關產(chǎn)品：NS-1細胞、CAL-51細胞、PTK 2細胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關產(chǎn)品：LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞
OVCAR 4細胞系相關產(chǎn)品：TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞
A375-MEL細胞系相關產(chǎn)品：Hs 746.T細胞、SKLU-1細胞、Porcine Kidney-15細胞
B10BR細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞
Hepa 1-6細胞系相關產(chǎn)品：H-2122細胞、UCH-1細胞、OCM1細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關產(chǎn)品：T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
RBL-I細胞系相關產(chǎn)品：PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
MV411細胞系相關產(chǎn)品：SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞
NCIH1836細胞系相關產(chǎn)品：WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞
Panc-1-P細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞
HBE細胞系相關產(chǎn)品：NCI-446細胞、RL細胞、mIMCD3細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關產(chǎn)品：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
Calu6細胞系相關產(chǎn)品：Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞
P-815細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
CCD33Co細胞系相關產(chǎn)品：T-47D細胞、U118-MG細胞、Leukemia L1210細胞
AN3細胞系相關產(chǎn)品：Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
PC3-M細胞系相關產(chǎn)品：Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞
SW 626細胞系相關產(chǎn)品：LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞
Lu-99A細胞系相關產(chǎn)品：P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞
U-2OS細胞系相關產(chǎn)品：RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞
RPMI 8402細胞系相關產(chǎn)品：Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞
ASH3細胞系相關產(chǎn)品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞
H1648細胞系相關產(chǎn)品：HFSF細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、HBE細胞
L 1210細胞系相關產(chǎn)品：BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞
HN-6細胞系相關產(chǎn)品：ANA-1細胞、SVG(P12)細胞、GM0637細胞
C666-1細胞系相關產(chǎn)品：AM細胞、CX1細胞、NCI H716細胞
RGE細胞系相關產(chǎn)品：Hs 683.T細胞、PK(15)細胞、NCI-H774細胞
MSTO211H細胞系相關產(chǎn)品：BJA-B細胞、H-1568細胞、130-T細胞
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