"NCI-H2170細(xì)胞：人肺鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞１９８９年建系，源自一位患有肺鱗狀細(xì)胞癌的男性，該患者不吸煙
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３—１：６傳代，３—５天換液１次
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對穩(wěn)定的時(shí)間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時(shí)間過長或過短：時(shí)間過長，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個(gè)細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-14細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞
SKCO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞
Mel-RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞
786.O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2347細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞
Balb/c 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACCM細(xì)胞、NRK細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞
WSU-DLCL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞
TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞
WM-266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-966SK細(xì)胞、T-HSC細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞
P3HR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞
NCI-H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1755細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞
SUDHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly19細(xì)胞、N1E115細(xì)胞、GM05887細(xì)胞
CAL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB231細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞、HSC細(xì)胞
AML-EOL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS1細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞
HCS2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞
N2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、SNU16細(xì)胞
N2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、SNU16細(xì)胞
SNU216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa 2059細(xì)胞、DI-TNC1細(xì)胞、HeLa細(xì)胞
bEND.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC5細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞
HCC9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU87細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞、T-47D細(xì)胞
CTV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid細(xì)胞： No. 6細(xì)胞、NEC細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞
MHCC97H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melanoma 14細(xì)胞、M-O7e細(xì)胞、H2030細(xì)胞
HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-813細(xì)胞、CX-1細(xì)胞、KNS62細(xì)胞
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞
ATN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR 10細(xì)胞、GM-215細(xì)胞、H-727細(xì)胞
CCLP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS0578T細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、F442-A細(xì)胞
NCI-H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-1細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞
WM 239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164 TC細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞
C-28I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPPVEC細(xì)胞、H-1650細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞
EFM19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC78細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞
SEG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞
KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞
U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞
SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZ細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞、NF639細(xì)胞
L-6 myoblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHKUBO細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞、TALL-104細(xì)胞
UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCFB（HCF）細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞、DH-82細(xì)胞
N-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK15細(xì)胞、MSF細(xì)胞、CG4細(xì)胞
NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞
BT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-460細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞
Blotchy fibroblast-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mevo細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞、UMC11細(xì)胞
MCCAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGHAVSMC細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞、H1437細(xì)胞
IAR 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG-108-15細(xì)胞、N9細(xì)胞、293 F細(xì)胞
C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
RCC 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM95細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞、T-84細(xì)胞
697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC3細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞
HT-1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞、KBM7細(xì)胞
Hi5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JC細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞
Clone 15 HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578Bst細(xì)胞、CW-2細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞
NCI-H1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 1細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞
SK-N-AS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP-1細(xì)胞、NCI N87細(xì)胞、CCRF細(xì)胞
MDA-MB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-53細(xì)胞、LA4細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞
373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC19細(xì)胞、MAVER1細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞
CG4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞、HCC1954-BL細(xì)胞
Reuber H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、JM細(xì)胞
T-ALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H716細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞
N1E-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：87MG細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞、AML193細(xì)胞
CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、H2198細(xì)胞
L929(NCTC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-26細(xì)胞、GP-293細(xì)胞、AHH1細(xì)胞
IBMF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC/mHSC細(xì)胞、SW954細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞
4-1st細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HL 60細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞
CV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hADSCs細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞、Z310細(xì)胞
NCL-H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM13細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞
HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞
NCI H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86.86細(xì)胞、CAL51細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞
NCI-H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 637細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞、PK13細(xì)胞
HUCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2132細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞
ME 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
MDCC-MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA10細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞
HT144mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞
GB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 680N細(xì)胞、H-1092細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞
Mel-RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細(xì)胞、HN6細(xì)胞、A-204細(xì)胞
DV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)n細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞
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