"NCI-H2170 Cell:人肺鱗癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:該細胞1989年建系,源自一位患有肺鱗狀細胞癌的男性,該患者不吸煙
LS 513細胞系相關產(chǎn)品:H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
38C-13細胞系相關產(chǎn)品:MAVER細胞、HT-3細胞、U343細胞
HuH6細胞系相關產(chǎn)品:Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
H4-IIE-C3細胞系相關產(chǎn)品:CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2170 Cell:人肺鱗癌細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3—1:6傳代,3—5天換液1次
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KS-SLK細胞系相關產(chǎn)品:SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞
RMS 1598細胞系相關產(chǎn)品:PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
NGEC細胞系相關產(chǎn)品:Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞
32Dc3細胞系相關產(chǎn)品:L-M(TK-)細胞、BMSCs(mBMSCs)細胞、BE(2)M-17細胞
MHHCALL2細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
細胞生長特性:貼壁生長
NCI-H2170 Cell:人肺鱗癌細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
BT 325細胞系相關產(chǎn)品:BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞
NCI-H747細胞系相關產(chǎn)品:C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞
OV90細胞系相關產(chǎn)品:McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞
OCILY-10細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞
MC57細胞系相關產(chǎn)品:NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞
B16細胞系相關產(chǎn)品:Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞
mIMCD3細胞系相關產(chǎn)品:BC-023細胞、CEM C7細胞、CNE-1細胞
NCI-H2170 Cell:人肺鱗癌細胞系
MBT-2細胞系相關產(chǎn)品:HEY-A8細胞、HT-1376細胞、EC109細胞
Panc-05.04細胞系相關產(chǎn)品:SW 1353細胞、WEHI164細胞、EVSA/T細胞
TE354T細胞系相關產(chǎn)品:A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關產(chǎn)品:PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞
EFO27細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
JM1細胞系相關產(chǎn)品:MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
NCI N87細胞系相關產(chǎn)品:MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
Chang Cells細胞系相關產(chǎn)品:Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞
T98-G細胞系相關產(chǎn)品:H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
T98-G細胞系相關產(chǎn)品:H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
BSC-1細胞系相關產(chǎn)品:COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
HK2細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞
3T3 L1細胞系相關產(chǎn)品:NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞
NUGC-3細胞系相關產(chǎn)品:H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
CT26WT細胞系相關產(chǎn)品:RAW-264.7細胞、hRMECs細胞、P3JHR-1細胞
NK-92MI細胞系相關產(chǎn)品:SLMT1細胞、SUPB-15細胞、NCI-SNU-407細胞
Nb2a細胞系相關產(chǎn)品:CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞
HUVEC細胞系相關產(chǎn)品:QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
HuTu-80細胞系相關產(chǎn)品:Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
COLO320HSR細胞系相關產(chǎn)品:H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞
COLO 206F細胞系相關產(chǎn)品:PLA 802細胞、CCD 966 SK細胞、Hi-five細胞
mRMEC細胞系相關產(chǎn)品:A375mel細胞、SCL-II細胞、SK-GT-2細胞
DMS 114細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB175VII細胞、BrCL12細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞
HCC95細胞系相關產(chǎn)品:RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
MLFC細胞系相關產(chǎn)品:Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞
SKNSH細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR 432細胞、Pfeiffer細胞、AR41P細胞
UMNSAH/DF-1細胞系相關產(chǎn)品:NCM-460細胞、NCIH1666細胞、H-1993細胞
HKBML細胞系相關產(chǎn)品:HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
TSUpr1細胞系相關產(chǎn)品:SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞
MODE-K細胞系相關產(chǎn)品:RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞
Caco2-BBE細胞系相關產(chǎn)品:Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞
AU-Mel細胞系相關產(chǎn)品:RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
T24(ECV304)細胞系相關產(chǎn)品:Porcine Kidney-15細胞、Panc 3.27細胞、DI TNC-1細胞
EST81細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1954細胞、WB-F344細胞、OVCAR.3細胞
Detroit562細胞系相關產(chǎn)品:NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞
HANK-1細胞系相關產(chǎn)品:HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞
IPLB-Sf21細胞系相關產(chǎn)品:OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞
HBE 135-E6E7細胞系相關產(chǎn)品:SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞
As-PC1細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-435-S細胞、U373細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
CFPAC-1細胞系相關產(chǎn)品:TMK1細胞、ACT-1細胞、JeKo-1細胞
TE-1細胞系相關產(chǎn)品:OC316細胞、Sf-21細胞、HCC-1395細胞
H8細胞系相關產(chǎn)品:SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
Panc10.05細胞系相關產(chǎn)品:MUGCHOR1細胞、MLE-12細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞
NCI-H2170 Cell:人肺鱗癌細胞系
HOSEpiC細胞系相關產(chǎn)品:Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞
MDAPCa-2b細胞系相關產(chǎn)品:TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關產(chǎn)品:U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
NRK-49F細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞
G-401細胞系相關產(chǎn)品:NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞
M07e細胞系相關產(chǎn)品:BS-C-1細胞、SW 1271細胞、LTEPsm細胞
SKNMC細胞系相關產(chǎn)品:KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞
CL MC/9細胞系相關產(chǎn)品:HFL 1細胞、Walker256-TC細胞、NOR-10細胞
SF539細胞系相關產(chǎn)品:K562細胞、SJ-Rh 30細胞、3T3NIH細胞
Med 341細胞系相關產(chǎn)品:373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞
SUPT-1細胞系相關產(chǎn)品:RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
OKAC1細胞系相關產(chǎn)品:P3JHR1細胞、KS-SLK細胞、AsPC-1細胞
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關鍵字: NCI-H2170 Cell:人肺鱗癌細胞系
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