"NCI-H322細胞：人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> 細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
T-ALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞
NCI-H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
P388.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKHEP1細胞、BT 549細胞、U-87MG ATCC細胞
ROS17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞
HM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞
SK-MEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HemECs細胞、HUT-28細胞、SW 403細胞
Intestinal Epithelioid細胞： No. 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4細胞、MESSA-DX5細胞、RCC4細胞
NCI-H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial細胞：-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
SEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
OE-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞
HK-2 [Human kidney]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞
LAN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞
HLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
CACO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞
MCF.10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
LLC PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20S細胞、LTEP-s細胞、JTC-28細胞
HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
KYSE-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-453細胞、PCI-SG231細胞、BV-2細胞
MB 157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC090細胞、Z-138細胞、Hepatoma 22細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
HC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞
KATOIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
DH 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞
MARC 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL2細胞、CP70細胞、T-T細胞
NCI-H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞
Japanese Tissue Culture-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-28細胞、Pa18C細胞、Molm14細胞
T.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU5細胞、H1838細胞、KNS81細胞
MCF7-CTRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞
SK-NMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T6細胞、PAI細胞、MAEC細胞
IHHA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞
OVCA420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞
CATH-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M210B4細胞、HCFB（HCF）細胞、Hs-688A-T細胞
MT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞
KYSE 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞
VM-CUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
AN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
H1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE1細胞、L cell細胞、LY細胞
MOLP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H157細胞、H-510A細胞、HCC-2935細胞
V79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞
Be Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB330細胞、LNCaP C4-2B細胞、IMR-32細胞
253JB-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
MDA435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞
RIN-m細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細胞、DMS 53細胞、BMU-S1細胞
NRK-52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、Mia PACA 2細胞、PC9細胞
HEL-92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35 Reuber細胞、SW620細胞、H-1836細胞
UCD-MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞
KYSE0030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞
Vertebral Cancer of the Prostate細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞
EMT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT-2細胞、OVCAR 4細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞
Calu-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞
hFOB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. No. 2細胞、NCI-446細胞、COV 504細胞
aTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D407 RPE細胞、NCTC 1469細胞、4T1細胞
OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WML2細胞、MBT2細胞、H-2591細胞
PC-3M IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vertebral Cancer of the Prostate細胞、MRC-V細胞、AML-12細胞
T-98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞
H2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SV-neo細胞、H2023細胞、RMa-bm細胞
MLE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞
A 72細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
Cates-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK 21細胞、AAV-293細胞、DC 2.4細胞
Soleus clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞
KM.12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞
HD-LM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC 20細胞、GM04679細胞、FU-MMT-1細胞
B95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 32.T細胞、CoC1細胞、118MG細胞
H-1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞
D 407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞
SK-MES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞
KNS42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞
NCI-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL1細胞、SW 48細胞、NCIH1651細胞
NRK49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN4741細胞、H23細胞、NF639細胞
H3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細胞、JJN-3細胞、GM02132C細胞
OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison細胞、T-CAM2細胞、SK-MEL-1細胞
HEK 293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag 8.653細胞、CHL/IU細胞、LC1細胞
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