"NCI-H322 Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞
UMUC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388D1細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞
SK-OV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-450細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H322 Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因?yàn)楹窟^低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HEP-3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2Z細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞
OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞
SSP-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T3細(xì)胞、MDCK細(xì)胞、MCF10-A細(xì)胞
Kupffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-729-T細(xì)胞、HN 4細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞
LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
NCI-H322 Cell:人肺癌細(xì)胞系
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至７０%單層時收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實(shí)驗(yàn)，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA157細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞、SNU119細(xì)胞
H-187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs27F細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞
SSP-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T3細(xì)胞、MDCK細(xì)胞、MCF10-A細(xì)胞
MUGCHOR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞
HCCC-9810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ES2細(xì)胞、CAL-148細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞
SUP-M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1271細(xì)胞、D283MED細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞
RC92A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1648細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞
NCI-H322 Cell:人肺癌細(xì)胞系
HPAF-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞、HMC3細(xì)胞
MOLM16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE14o細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞、HSF細(xì)胞
Hut292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H650細(xì)胞、GM3569細(xì)胞、H-841細(xì)胞
CFSC-2G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2405細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞
H-1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKC細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞
BT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-90細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞、PANC-04-03細(xì)胞
LNCaP clone FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、H2330細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞
FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞
NCI-H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞
NCI-H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞
U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞
McA-RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1373細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞
OCI Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1437細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞
Leukemia L1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞、HCGC細(xì)胞
RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞
AU-565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC-103H細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞
WIL2-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 824細(xì)胞、TH1細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞
CMT-167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC21H細(xì)胞、Hs-578-T細(xì)胞、SU8686細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞
CCD33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47D細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞
CCD33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47D細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞
TSUpr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞
SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞
LY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H7721細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞
H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1882細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞
V79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII-WT細(xì)胞、SW-948細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞
CA 46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283 Med細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞、Colo741細(xì)胞
MKN-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY-5Y細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞
H295R-S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU565細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞
HT-55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-474細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞
P3.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ect1/E6E7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、H446細(xì)胞
VA-ES-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞
H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 934.T細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞
SK-SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7701細(xì)胞、SKO007細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞
SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞
UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞
MV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE7細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞、RD-2細(xì)胞
MV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE7細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞、RD-2細(xì)胞
J45.01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-87細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞
Ramos (RA)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、H19-7細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞
NCI-H322 Cell:人肺癌細(xì)胞系
HOCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2-DAP細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞
H-2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kelly細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞、Reh細(xì)胞
PK-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIGI細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞、GB1細(xì)胞
Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-739細(xì)胞、95-D細(xì)胞、87MG細(xì)胞
PC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-69細(xì)胞、NCIH2591細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞
MB 157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC090細(xì)胞、Z-138細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞
HFT-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1155細(xì)胞、TJ905細(xì)胞、Capan2細(xì)胞
VK2 (E6/E7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320細(xì)胞、GM0637細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞
SW260細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-10細(xì)胞、PLMVEC細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞
CHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-128細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞
P36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGSMC細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞、NHDF細(xì)胞
BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 19細(xì)胞、526 mel細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞
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關(guān)鍵字： NCI-H322 Cell:人肺癌細(xì)胞系
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