"JB6 Cl 30-7b細胞：小鼠表皮細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應(yīng)的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導(dǎo)致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
RIN-m細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細胞、DMS 53細胞、BMU-S1細胞
HNE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞
ST-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞
LNT-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
HPAF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
MOLM-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞
EO771細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH841細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、Hs 852.T細胞
SUM 149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞
A375-S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
XWLC-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞
NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞
OCI-Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞
RMG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
EL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
PanC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB1 Lu細胞、OLN-93細胞、M-20細胞
aNK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA8細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞、NALM-6-M1細胞
BC-009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7細胞、L-540細胞、Pt-K1細胞
SUDHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞
Hep3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞
H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞
EFM-192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞
SW 527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
MGECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBR-3細胞、Hs 611.T細胞、QBC(939)細胞
TMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC細胞、NCIH1819細胞、RSC-96細胞
JKT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞
769-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞
MDA 1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞
NRK clone 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322T細胞、OVCA-420細胞、OE21細胞
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
KY70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞
alphaTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞
NCM-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
6T-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞
Tu686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞
C127細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 4細胞、Swiss-3T3細胞、H-2087細胞
RAW2647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞
PG-4 S+L-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
Jeko1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
CCD-1112sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞
Melanoma 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T. T細胞、NSC-34細胞、OVCAR5細胞
OEC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-1細胞、HPF細胞、Wien133細胞
RPMI-7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞
RBVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML2細胞、HDLM2細胞、HBZY 1細胞
LC1-Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCI1細胞、NBL-2細胞、Pa17C細胞
SVOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-1-P細胞、HCC94細胞、B10BR細胞
870細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞
CCD-19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞
AHH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞
BIU87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2591細胞、NCI-H358細胞、HSAEC1-KT細胞
HONE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
HUT-226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC23細胞、COLO-699細胞、OVCAR10細胞
COR-L26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ 138細胞、Psi2 DAP細胞、JB-6細胞
AZ 521細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞
RSC96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
RM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞
6-10B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞
786-O RCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
Tissue Culture-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞
Psi-2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC-E2G8細胞、IEC-6細胞、OKa-C-1細胞
NCI-H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSC4.1細胞、PT67細胞、H2108細胞
tdott細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0813細胞、PC-3M-2B4細胞、U-2932細胞
SW-837細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞
N-Tera-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞
COR-L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞
EL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
H-1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞
B16BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞
IPECJ2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞
OEC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞
EFM-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細胞、D-407細胞、Colon 38細胞
UPCI:SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1.6細胞、HT-115細胞、CWR22R細胞
ST-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 756細胞、HEp-2細胞、LS 174T細胞
CCD 841 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LC-MS細胞、HTR8svn細胞、Hep II細胞
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