"MDA-MB-435S細胞：人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞背景資料：MDA-MB-４３５S是一種紡錘形的細胞，１９７６年由其親本(４３５)中篩選得到。４３５是從３１歲的轉(zhuǎn)移性乳腺導(dǎo)管腺癌女性患者胸水中分離得到。當用熒光染料對微管蛋白進行染色時親本細胞顯現(xiàn)散布特征(II型)。最近通過cDNA陣列研究表明，親本(MDA-MB-４３５)可歸入黑素瘤起源。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘，１：２,３天內(nèi)可長滿
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
COLO 357細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞
NCI-H165細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69C細胞、MC-4細胞、HPF細胞
H-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
Mo 59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
HUV-EC-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞
LNCaP-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL26細胞、NCI-H250細胞、RA 1細胞
NIE-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞
Panc 3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞
HOP62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
CF-1 MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-62細胞、RM1細胞、NCI-H-82細胞
NG 108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
hTERT RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
Pa16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞
MS-751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
COLO 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E細胞、SUM 102PT細胞、COLO_320DM細胞
COLO 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E細胞、SUM 102PT細胞、COLO_320DM細胞
HIBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
Panc-327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞
H-2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞
NIH3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
PA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞
PK 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞
H-1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD15細胞、H-2135細胞、OCI/AML2細胞
AG06814-N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-838細胞、SKNO1細胞、TE8細胞
Institute for Medical Research-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-415細胞、HCC1187細胞、COLO357細胞
HEK-293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞
Duke University 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M619細胞、D-283 Med細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞
B16-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞
PLCPRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞
Hs27F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞
RPMI2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
LS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2195細胞、NCI-H1668細胞、HCC1954細胞
293S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
LIM1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
AgC11x3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞
CTX TNA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
Mevo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞
RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
SK-Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683細胞、KYSE 140細胞、Murine Leydig Tumor細胞：-1細胞
COLO 829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞
HTori 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
P388.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKHEP1細胞、BT 549細胞、U-87MG ATCC細胞
KASUMI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞
RCC-10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞
CALU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞
RPMI 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid細胞： No. 18細胞
MDA MB 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞
LN-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGCs細胞、786-0細胞、hSCC-25細胞
C2-C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞
Human Microvascular Endothelial細胞：-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞
Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
mREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞
mREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞
MGHU3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞
MOLM-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞
HS-445細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC.3細胞、HLE-SRA-01/04細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞
ROS 17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞
NCIH3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞
NCI-SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞
FL 62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞
HuCCT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98細胞、AR-42J細胞、RPMI1788細胞
SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
NCI-H69C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.28細胞、KNS42細胞、HEK;293細胞
NCI-H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞
PTK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 699細胞、WEHI 3B細胞、SNU-638細胞
8305-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細胞、NCIH2452細胞、HTR8svn細胞
H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo16細胞、NOZAWA細胞、WI 38細胞
MGECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH28細胞、NCIH1755細胞、DC 2.4細胞
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