"MDA-MB-435S Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞背景資料：MDA-MB-４３５S是一種紡錘形的細胞，１９７６年由其親本(４３５)中篩選得到。４３５是從３１歲的轉(zhuǎn)移性乳腺導(dǎo)管腺癌女性患者胸水中分離得到。當用熒光染料對微管蛋白進行染色時親本細胞顯現(xiàn)散布特征(II型)。最近通過cDNA陣列研究表明，親本(MDA-MB-４３５)可歸入黑素瘤起源。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MDA-MB-435S Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
A20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
H-2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞
細胞傳代方法：消化３-５分鐘，１：２,３天內(nèi)可長滿
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SKLMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞
SBC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞
INS1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞
細胞生長特性：貼壁生長
MDA-MB-435S Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞形態(tài)特性：紡錘形
接收細胞相關(guān)問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導(dǎo)致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
HT-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
Balb/c 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞
OCIAML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞
CCC-HHM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
Hs 729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
WISH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞
SNB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞
MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞
TE10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79-4細胞、GM12878細胞、MPC5細胞
COLO-320-DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GEO細胞、KYSE-520細胞、SW1353細胞
U266-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
HEL299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
DMS 273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞
MDA-MB-435S Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
Mouse Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC1細胞、SNU-484細胞、MDA-231細胞
MAVER-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞
SU-DHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞
SU-DHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞
TE10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79-4細胞、GM12878細胞、MPC5細胞
CMT-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞
C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-024細胞、NCI-H1693細胞、MDAMB453細胞
H1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞
PC-9/S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞
NCIH23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞
130T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞
Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87細胞、SNU761細胞、3396細胞
CAKI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞
SR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1788細胞、CaEs17細胞、MALME.3M細胞
Mhh-Call 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2-293細胞、RBVEC細胞、J 774A.1細胞
NCL-H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞
OVCAR432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞
C4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞
BC-022細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL-4細胞、COLO 206F細胞、RPMI-7666細胞
Swiss 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞
BHK 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞
Vx2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：697細胞、NCIH2196細胞、Psi-2 DAP細胞
A-1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-29細胞、HuTu-80細胞、6-T CEM細胞
HLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞
NCIH1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞
CHO cell clone K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞
SKG-3a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL1細胞、NIT-1細胞、Hs 604.T細胞
Panc813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞
RERF-LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞
BA/F3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞
HCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞
RFL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC2B細胞、PG13細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞
K562/ADP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞
SN12C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H727細胞、D283-MED細胞、TJ905細胞
NCI-H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞
NP69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞
Vero C1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞
SUM-52-PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 175 VII細胞、HN13細胞、HuH1細胞
H1650_CO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞
A 253細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞
LN299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞
RD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞
MDA-MB-435S Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
MB 157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC090細胞、Z-138細胞、Hepatoma 22細胞
Hep G2-Luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
BTI-TN5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞
TCCSUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DiFi細胞、FOX-NY細胞、KYSE-70細胞
293-GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
WM451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 1.Tes細胞、U-138 MG細胞、NK10a細胞
CCRF-SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM 1細胞、NS1-1 Ag4.1細胞、C12細胞
LO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm-5F細胞、AML-12細胞、SK.OV.3細胞
SW-1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細胞、U266S細胞、CCD19-Lu細胞
OCIAML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BetaTC6細胞、SHEP1細胞、Med 341細胞
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