"BT-474 人乳腺導(dǎo)管瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
常見培養(yǎng)細胞預(yù)防污染的有效措施：體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時，有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手：１)添加抗生素：各種抗生素性質(zhì)不同，對各種微生物的作用也不同，聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好，預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體特效抗生素)。但反復(fù)使用抗生素會使微生物產(chǎn)生耐藥性，且對細胞本身也有一定影響，因此為避免誘導(dǎo)抗藥細菌，應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素，或盡可能不用抗生素處理；２)從物品、用品消毒滅菌著手：細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應(yīng)選擇最后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作：７５%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后，使用可移動的紫外燈至少消毒３０min，加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制３００ml的飽和酸銅加３L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
BT-474 人乳腺導(dǎo)管瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分 
BT-474 人乳腺導(dǎo)管瘤細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
Ketr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞 
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞 
Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞 
Sup T-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞 
MOLP8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞 
LS 174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞 
NKL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞 
MDA MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞 
BT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞 
Panc-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC3細胞、LC-2 ad細胞、MARC-145細胞 
PA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞 
NKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-SVEC01細胞、SCL-1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞 
Scott and White No. 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞 
B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞 
SNK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1882細胞、NCI-H847細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞 
HT(H9)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞 
HT(H9)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞 
Kasumi 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞 
LS-174細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞 
KM H-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1838細胞、Kit 225細胞、AZ521細胞 
BT-474 人乳腺導(dǎo)管瘤細胞系
KY70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞 
OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞 
Hos TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS1細胞、H650細胞、ACC3細胞 
BCECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC403細胞、MCF-7/ADR-RES細胞、MDA-MB 468細胞 
RCC 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞 
CAL 12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞 
Sp2/0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞 
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞 
C41細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞 
MOLT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞 
L-cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞 
MDAMB435S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/BBe 1細胞、TOV21細胞、NCI-SNU-520細胞 
PA12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R-1059-D細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、EMT-6細胞 
NCIH1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞 
NIH:OVCAR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞 
RIN m5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2141細胞、ROS-17/2.8細胞、SF 295細胞 
MFM-223細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU-1細胞、KM12-SM細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞 
EFM192A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8-653細胞、HSC（Human Schwann）細胞、SU-DHL-8細胞 
Huh-7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞 
D-283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 Ad5細胞、KMS-18細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞 
FDCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞 
YH-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞 
DoTc2-4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞 
ST2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞 
IPLB-Sf21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞 
U2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞 
NCIH1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞 
KNS-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞 
LK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞 
Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞 
CCD-841CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細胞、Tsup-1細胞、hTERT-RPE細胞 
Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞 
SKNBE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞 
Hs729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 08.13細胞、HONE1細胞、MC3T3-E細胞 
HCC-2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞 
NCI-H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEM細胞、CaES-17細胞、Jiyoye(P-2003)細胞 
DSL6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞 
RIN-m5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIN87細胞、CCC-HHM-2細胞、639V細胞 
MyLa 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞 
NCI-H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞 
PANC-10-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-878細胞、TGBC11TKB細胞、B16 BL6細胞 
BT-474 人乳腺導(dǎo)管瘤細胞系
NCI-H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞 
PF382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞 
HO1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞 
Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞 
Vero 76 clone E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞 
beta-TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞 
HOS-MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB1細胞、HUC細胞、H187細胞 
J82COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞 
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞 
NCI-SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-330細胞、OE21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞 
RC-K8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-FT細胞、LAN-5細胞、DrG細胞 
Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCLCD細胞、251 MG細胞、IGROV 1細胞 
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