"BT-474 Cell:人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
HOSEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Toledo細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞、P-36細(xì)胞
SNU620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H196細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞、DU-145細(xì)胞
LY-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細(xì)胞、A498細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞
Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-11細(xì)胞、H-128細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
BT-474 Cell:人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞系
細(xì)胞消化過(guò)程總結(jié)：其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了，說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi)）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái)，這個(gè)時(shí)候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過(guò)２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個(gè)細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤(rùn)洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞凍存的步驟：１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇；３)將分裝上述細(xì)胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過(guò)夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過(guò)夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SNU869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞、A2780CP70細(xì)胞
Kit-225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-420細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞、ABE8.1/2細(xì)胞
Tsup-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCFSTTG1細(xì)胞、58F細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞
DR2R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J細(xì)胞、50.B1細(xì)胞、Tregs細(xì)胞
L-6TG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-2003細(xì)胞、A875細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
BT-474 Cell:人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)：體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞，并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后，由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細(xì)胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增３～６次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/１００個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)３～５％；細(xì)胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時(shí)期，稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期)，適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟：１.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞，如果細(xì)胞變圓，相互之間不再連接成片，這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細(xì)胞懸液。３.將細(xì)胞懸液吸出２ml左右，加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細(xì)胞在２小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層，需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
Kit225 K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2780細(xì)胞、PA12細(xì)胞、NCI-H508細(xì)胞
NCIH1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞
COV434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRS-82細(xì)胞、NWA細(xì)胞、FL83B細(xì)胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901/DDP細(xì)胞、BAEC細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞
SKG-IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE80細(xì)胞、BC-019細(xì)胞、H-2196細(xì)胞
C-4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞
DMS-53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDEC細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞
BT-474 Cell:人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞系
MC57G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8svn細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞、HT144細(xì)胞
GT38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOG細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞
OVCA433_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE 1201細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、T1-73細(xì)胞
BALB/3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-ori細(xì)胞、RC-2細(xì)胞、LS-174細(xì)胞
190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.T細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞
C4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BpRc1細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞
BRL-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-6細(xì)胞、Hi5細(xì)胞、KM.12細(xì)胞
SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO.205細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞、W256細(xì)胞
HPAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞
HPAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞
Panc5.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs281T細(xì)胞、H2342細(xì)胞、TOV21細(xì)胞
PK (15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404D細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞
SK-NEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL II細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞
MCA38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-hth74細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞
HLE-SRA-01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2.03細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞
L- cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR 106細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞
HEK293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
RBSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞、FHL124細(xì)胞
NT2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2170細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞、Y79細(xì)胞
T47-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 1210細(xì)胞、EFM-19細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞
HCT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-3J細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞
IB-RS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1417細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞
KLN-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCS細(xì)胞、H1437細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞
MDA231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CSQT-2細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞
Lewis Lung Cancer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞
IM9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chang Cells細(xì)胞、W256細(xì)胞、FTC133細(xì)胞
Mevo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sci-1細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞
SUM 149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3-LL細(xì)胞、SHEE細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞
FC33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac1細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞、AM38細(xì)胞
SVHUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2052細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞
ZR751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞
PT-67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、C666-1細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞
SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞
ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞
CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞、RC13細(xì)胞
H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞
SKNO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞、CT26細(xì)胞
McARH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIADR.RES細(xì)胞、MRCV細(xì)胞、MASMC細(xì)胞
HMCB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞
ECC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2細(xì)胞、J774細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞
MLE 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA144細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞、GM03569細(xì)胞
BT-474 Cell:人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞系
HuTu-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞
SJ-Rh 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC PK1細(xì)胞、H716細(xì)胞、RKN細(xì)胞
NS1-Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL2細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞、BHK細(xì)胞
HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞
B958細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A.1細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞
HEK/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K 562細(xì)胞、HT3細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞
NCIH1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-125細(xì)胞、EB-2細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞
3T3-Swiss細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 24細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH-13細(xì)胞、SLK細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞
Hs940T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/ATCC細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞
SW-954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB 611細(xì)胞、KG1細(xì)胞、PC 12細(xì)胞
3AA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、NHDF細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞
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