"SK-N-BE(2)-C 人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：神經(jīng)母細胞瘤；骨髓轉(zhuǎn)移；男性 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
SK-N-BE(2)-C 人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁 
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細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
H510A細胞系相關產(chǎn)品：DHL-5細胞、PLB 985細胞、COLO-741細胞 
P3-X63-Ag 8.653細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1618細胞、NBLS細胞、TGW細胞 
CALU1細胞系相關產(chǎn)品：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞 
SVEC4-10細胞系相關產(chǎn)品：Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞 
H660細胞系相關產(chǎn)品：TE5細胞、MC3T3-E1(C4)細胞、UPCI-SCC-90細胞 
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關產(chǎn)品：Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞 
IR 983F細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞 
NCI-H102細胞系相關產(chǎn)品：KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞 
PL9細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞 
NCI-H1092細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞 
D 407細胞系相關產(chǎn)品：HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞 
H460細胞系相關產(chǎn)品：Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞 
BT 325細胞系相關產(chǎn)品：BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞 
NCI-H87細胞系相關產(chǎn)品：7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞 
OCI-Ly 19細胞系相關產(chǎn)品：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞 
P30/0HK細胞系相關產(chǎn)品：UMUC3細胞、H2107細胞、293 Ad5細胞 
P30/0HK細胞系相關產(chǎn)品：UMUC3細胞、H2107細胞、293 Ad5細胞 
Walker 256細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞 
H1838細胞系相關產(chǎn)品：DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞 
NCIH250細胞系相關產(chǎn)品：NCIH322細胞、8305-C細胞、SNU-761細胞 
SK-N-BE(2)-C 人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
HEL 299細胞系相關產(chǎn)品：H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞 
Hs 888.T細胞系相關產(chǎn)品：SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞 
H-716細胞系相關產(chǎn)品：CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞 
H358細胞系相關產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞 
H125細胞系相關產(chǎn)品：MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞 
C666-1細胞系相關產(chǎn)品：AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞 
MDA-PCa-2b細胞系相關產(chǎn)品：H-2110細胞、HT144mel細胞、MLMEC細胞 
Normal Rat Kidney-52E細胞系相關產(chǎn)品：U-138-MG細胞、MDA-MB157細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞 
MV 4;11細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞 
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞系相關產(chǎn)品：H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞 
CAL-39細胞系相關產(chǎn)品：B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞 
RAW 264.7細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞 
H-1930細胞系相關產(chǎn)品：PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞 
Mel RM細胞系相關產(chǎn)品：MFC細胞、HEK-293-F細胞、H2135細胞 
VMRCLCD細胞系相關產(chǎn)品：L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞 
Huh 7.5細胞系相關產(chǎn)品：MiaPaCa2細胞、Lewis Lung Cancer細胞、SUM 190細胞 
MB49細胞系相關產(chǎn)品：HOC細胞、SF-763細胞、Mhh-Call 2細胞 
OCI-Ly07細胞系相關產(chǎn)品：MDA-175細胞、Nthy-ori 3-1細胞、U118MG細胞 
HLE-B3細胞系相關產(chǎn)品：2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞 
SW 756細胞系相關產(chǎn)品：G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞 
QG56細胞系相關產(chǎn)品：EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞 
GDM-1細胞系相關產(chǎn)品：MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞 
ARO81細胞系相關產(chǎn)品：SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞 
IOSE29細胞系相關產(chǎn)品：C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞 
16HBE細胞系相關產(chǎn)品：MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞 
U-CH1細胞系相關產(chǎn)品：CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞 
A549/DDP細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞 
H-1435細胞系相關產(chǎn)品：YD15細胞、H-2135細胞、OCI/AML2細胞 
KLM1細胞系相關產(chǎn)品：EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞 
UM-UC14細胞系相關產(chǎn)品：NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞 
CCRF-CEM細胞系相關產(chǎn)品：SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞 
NCI-322細胞系相關產(chǎn)品：H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞 
B16 melanoma細胞系相關產(chǎn)品：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞 
HFTF細胞系相關產(chǎn)品：HeLa細胞、AX-Mel細胞、NCIH1048細胞 
Sp2/mIL-6細胞系相關產(chǎn)品：MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞 
TFH細胞系相關產(chǎn)品：RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞 
TFH細胞系相關產(chǎn)品：RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞 
HEK293EBNA細胞系相關產(chǎn)品：OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞 
HARA-B細胞系相關產(chǎn)品：HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞 
HGE細胞系相關產(chǎn)品：Hs343T細胞、ECGI10細胞、A-2058細胞 
IGROV 1細胞系相關產(chǎn)品：HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞 
SK-N-BE(2)-C 人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
REC1細胞系相關產(chǎn)品：MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞 
IALM細胞系相關產(chǎn)品：DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞 
H-889細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞 
H647ell細胞系相關產(chǎn)品：SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞 
M14-MEL細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞 
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞 
HB 611細胞系相關產(chǎn)品：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞 
ETCC007細胞系相關產(chǎn)品：VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞 
KTC-1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞 
Vero-76細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat Clone E6-1細胞、HCC-78細胞、SKO007細胞 
MH-S細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NCI-H2452細胞、COLO 320DM細胞 
CALU1細胞系相關產(chǎn)品：LUDLU1細胞、LS-513細胞、COLO320/DM細胞 
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