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產(chǎn)品描述：

產(chǎn)品名稱：MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit

描述:

MTT 法又稱 MTT 比色法，是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀 酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT 結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比，吸光度越大，表示細(xì)胞活性越強，說明藥物毒性越小。該方法已廣泛用于一些生物活性因子 的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度 高、經(jīng)濟(jì)。

別名: MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒；MTT kit

使用方法: 1、將細(xì)胞板放置于無菌操作臺中。 2、在細(xì)胞板中每孔加入10%體積的 MTT溶溶劑。 【MTT溶液的配制：用5ml MTT溶劑溶解25mg MTT，配制成5mg/ml的MTT溶液。配制后即可使用，或直接-20℃避光保存，也可以根據(jù)需要適當(dāng)分裝后-20℃避光保存?！?3、將細(xì)胞板放回培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育3 - 4小時。做對比試驗時，孵育時間需一致。 4、孵育后將細(xì)胞板從培養(yǎng)箱中拿出，按照下面的方法溶解產(chǎn)生MTT甲臜結(jié)晶物。 （1）如果是貼壁細(xì)胞，則棄去培養(yǎng)基。加入與初始體積等量的Formazan Solvent。每孔的溶解液體積可能不同，但為了方便比較，總體積須保持一致。 （2）如是非貼壁細(xì)胞或培養(yǎng)基的去除會造成MTT甲臜丟失，則直接在培養(yǎng)基中加入與初始體積等量的溶解 液。 （3）加入 Formazan Solvent 后，須在 1 小時內(nèi)完成讀數(shù)。 5、在搖床中溫和地振蕩可增強溶解。某些情況下，尤其是細(xì)胞密度較高時，需要反復(fù)吹打使 MTT 甲臜結(jié) 晶物完全溶解。 6、分光光度計測定 OD570 和參考波長 OD690。 7、96 孔板可以在配備合適濾光片的酶標(biāo)儀上進(jìn)行檢測。 8、其他類型的多孔板則需用合適大小的比色皿或讀板器進(jìn)行分光光度檢測。

儲存/保存方法: 2~8℃，避光保存，有效期12個月。

注意事項: 1、由于使用96孔板進(jìn)行檢測，如果細(xì)胞培養(yǎng)時間較長，一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面，由于96孔板周圍一圈最容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。 2、若所用受試化合物與MTT能夠反應(yīng)，可先離心后棄去培養(yǎng)液，小心用PBS沖2~3遍后，再加入含MTT的培養(yǎng)液。 3、Formazan的生成不僅與活細(xì)胞數(shù)成正比，也受作用時間的影響，因此樣品較多時測定的結(jié)果可能隨時間而變。 4、本品含有致癌物質(zhì)，避免與皮膚和眼睛接觸，請小心操作。為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 5、本產(chǎn)品只用于科研，不可應(yīng)用于臨床或診斷。

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