"JOSK-M Thawing人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：急性單核細(xì)胞白血病；男性
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
JOSK-M Thawing人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
細(xì)胞傳代注意事項(xiàng)：①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材；②每天觀察細(xì)胞形態(tài)，掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長(zhǎng)致密時(shí)即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持：細(xì)胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來實(shí)現(xiàn)。對(duì)每一個(gè)細(xì)胞系來說都有其自身的特點(diǎn)，要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)（或隔夜）→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液（92%血清）2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量?jī)龃嬉?，用吸管吹打制成?xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動(dòng)冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
JOSK-M Thawing人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
SKBR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1846細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞
Panc-327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-12細(xì)胞、SN12C細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞
EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞
KYSE-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞
Tregs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-3細(xì)胞、SCC9細(xì)胞、SKNBE2細(xì)胞
OE21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H508細(xì)胞、ECV304細(xì)胞、H64細(xì)胞
MDA-MB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD966SK細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞
MiaPaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細(xì)胞、FET細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞
SNU5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C2B細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞
HBL-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-I/1細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞、Hs27細(xì)胞
GM07404A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU407細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞
BEL 7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H128細(xì)胞、D-341細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞
HCEC-B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AX-Mel細(xì)胞、MNNG細(xì)胞、H-1975細(xì)胞
MyLa 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞
TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細(xì)胞、X63細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞
OCI-LY-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、NG10815細(xì)胞
MC-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1428細(xì)胞、C3A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞
SW 1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239A細(xì)胞、PF382細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞
BE2-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO680N細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、SW1222細(xì)胞
NOR10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-387細(xì)胞、SL-29細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞
Hs839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC154細(xì)胞、VMM39細(xì)胞、Becker細(xì)胞
LA4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA-1細(xì)胞、NS1細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞
SHEE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320/DM細(xì)胞、SBC5細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞
U251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia L1210細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞
SNU407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL6細(xì)胞、SNU251細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞
SNK-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞、HL1細(xì)胞
JOSK-M Thawing人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
TE13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1944細(xì)胞、GM05372細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3M細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞、MLM細(xì)胞
SUM 159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132細(xì)胞、TE-5細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞
Hs 606細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L132細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞、NTERA-2 clone D1細(xì)胞
PC-3M-2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBC-SD細(xì)胞、HUT125細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞
OAW42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC細(xì)胞、M210B4細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞
PLA801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388-D1細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞
HCT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞
PANC0203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR3細(xì)胞、SNU423細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞
HCMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2B細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞
HuH-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞
2B4-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNF1細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞、GM04680細(xì)胞
SKCol1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT 20細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞
NCIH740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95C細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞
HCC-94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE D407細(xì)胞、8226/S細(xì)胞、H2081細(xì)胞
HCC-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Skin細(xì)胞、N-9細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞
HET1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L279細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞、HAVSMC細(xì)胞
HCT-116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-I-nu細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞、HCET細(xì)胞
NCIH1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2 B細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞
NCIH196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES 2細(xì)胞、AZ521細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞
PFSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT38細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞
KYSE-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR432細(xì)胞、KE37細(xì)胞、B78細(xì)胞
COLO 741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞
HEB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS26細(xì)胞、H-847細(xì)胞、EB1細(xì)胞
NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞
GT38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOG細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞
H-1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1/A細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞、Hca-F細(xì)胞
HL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、H1792細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞
H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞
HS-729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞
NCI-H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞
HBL-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-I/1細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞、Hs27細(xì)胞
IOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞
JOSK-M Thawing人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞
WSU-DLCL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞
RPMI 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-611-T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞
GC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞
32D CL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H87細(xì)胞、Colo-201細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞
Hs 729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Hep1細(xì)胞、YES-2細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞
Pa017C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA802細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞、Li-7細(xì)胞
3T3L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATHa細(xì)胞、RKOAS451細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞
A2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OsACL細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞
NRCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fu97細(xì)胞、8505C細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞
JHH-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞
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