"EU-4 Thawing人急性髓系白血病細胞系
細胞背景資料：兒童急性髓系白血病
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
EU-4 Thawing人急性髓系白血病細胞系
細胞生長：懸浮
細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，最后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
EU-4 Thawing人急性髓系白血病細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞培養(yǎng)實驗相關(guān)問題總結(jié)：支原體(mycoplasma)污染的細胞，是否能以肉眼觀察出異狀？不能。除極有經(jīng)驗之專家外，大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株，無法以其外觀分辨之；支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響？支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù)，代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前，必須確認細胞為mycoplasma-free，實驗結(jié)果之數(shù)據(jù)方有意義；偵測出細胞株有支原體污染時，該如何處理？直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細胞株；CO２培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔？定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之；為何培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，顏色會偏暗紅色，且pH值會越來越偏堿性？培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)之CO２會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果，將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時，可以通入無菌過濾之CO２，以調(diào)整pH值；購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
AN3 CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞
HET-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞
NCI-H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞
BT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞
Calu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-140細胞、BCAP37細胞、NCI-BL2141細胞
T98-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
Panc 10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
HCC-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞
HA1800細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUSMC細胞、SUDHL-10細胞、K7M2-WT細胞
DMS 114細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175VII細胞、BrCL12細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞
NCIH1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CW2細胞、SUM52PE細胞、SVEC 4-10細胞
OS-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
SW1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞
THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
V79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN5細胞、P3HR-1細胞、W133細胞
MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC3細胞、CATH-a細胞、MFE-296細胞
ACC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細胞、Detroit562細胞、OC-316細胞
B16F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
MCF.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP1細胞、HCEC細胞、AGS細胞
T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞
Karpas422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
Karpas422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
Y3-Ag1,2,3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910細胞、CD18/HPAF細胞、LLC-MK2細胞
bEnd.3[BEND3]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞
U266S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1細胞、NCI-H2198細胞、SNU-449細胞
HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞
EU-4 Thawing人急性髓系白血病細胞系
HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞
Clone Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
C3H/10T1/2 clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 32細胞、PIG1細胞、RPMI-8402細胞
786.O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2347細胞、Caov-3細胞、NCIH1838細胞
Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞
Panc04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92細胞、NF639細胞、Rabbit Kidney 13細胞
PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞
SK-MEL24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV 1細胞、EFM192B細胞、COLO-1細胞
NB1RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-2-LUC細胞、H-1819細胞、SHIN-3細胞
U87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-19細胞、EFM-192C細胞、BHK 21細胞
WM-266-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞
HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
V79-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞
CATHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB17細胞、GM 637細胞、GM 637細胞
HIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞
SACC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
GM3190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞
MMVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞
Rat Lung-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
Hs 294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 clone D1細胞、OVCAR.5細胞、CHL細胞
Huh 7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa2細胞、Lewis Lung Cancer細胞、SUM 190細胞
KYSE 510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
SKMEL24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone 3細胞、UMNSAH/DF-1細胞、RGC6細胞
OCI-LY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞
HPC-Y5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞
BALB/3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞
SUM190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞
QSG7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT-1細胞、CCRF-SB細胞、PGBE1細胞
SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞
HSC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞
CF-PAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2452細胞、P30/Ohkubo細胞、NCC-IT細胞
Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞
EU-4 Thawing人急性髓系白血病細胞系
MC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞
MS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞
HGBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
UMC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
HRA-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
LO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
CG4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞
PE/CA-PJ-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞
HT-1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
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