"EU-4 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
細胞背景資料:兒童急性髓系白血病
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
H1522細胞系相關產(chǎn)品:Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞
MV411細胞系相關產(chǎn)品:SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞
HUT125細胞系相關產(chǎn)品:MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞
細胞生長:懸浮
EU-4 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內毒素直接參與細胞凋亡,血清中內毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉放-20℃ 1 hour,再轉入-70至-80℃過夜,之后才可以轉移到液氮內(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Hs822T細胞系相關產(chǎn)品:BL6細胞、HR-1細胞、HLE細胞
HCC2218細胞系相關產(chǎn)品:Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
HC11細胞系相關產(chǎn)品:MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
NCI-SNU-620細胞系相關產(chǎn)品:NCI-441細胞、MKN 28細胞、MHCC97-L細胞
Human Embryo Lung-1細胞系相關產(chǎn)品:H-1437細胞、SKNBE(1)細胞、TKB-1細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
EU-4 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
細胞生長特性:懸浮
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
B16/BL6細胞系相關產(chǎn)品:ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
LUDLU 1細胞系相關產(chǎn)品:HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞
C8166-CD4細胞系相關產(chǎn)品:KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞
T47D細胞系相關產(chǎn)品:AR-42J細胞、Hs895T細胞、Hs888T細胞
HUC細胞系相關產(chǎn)品:FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞
COLO-320DM細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞
HCT/Taxo1細胞系相關產(chǎn)品:NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞
GM03570細胞系相關產(chǎn)品:Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞
OVCA432細胞系相關產(chǎn)品:KU 19-19細胞、REC-1細胞、H-838細胞
HCC-15細胞系相關產(chǎn)品:MRMT-1細胞、Swiss 3T3細胞、OCI-Ly1細胞
EU-4 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
D562細胞系相關產(chǎn)品:MIA-PaCa-2細胞、HFT8810細胞、SHSY5Y細胞
8305C細胞系相關產(chǎn)品:MKN28細胞、NCI-H719細胞、SK-MEL2細胞
SKMES1細胞系相關產(chǎn)品:MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞
RPMI 8226/S細胞系相關產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞
PL5細胞系相關產(chǎn)品:PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞
Be Wo細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB330細胞、LNCaP C4-2B細胞、IMR-32細胞
Be Wo細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB330細胞、LNCaP C4-2B細胞、IMR-32細胞
DMS53細胞系相關產(chǎn)品:Ca-Ski細胞、L428細胞、H1836細胞
EM-3細胞系相關產(chǎn)品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞
P3X63Ag8653細胞系相關產(chǎn)品:A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞
SCCVII細胞系相關產(chǎn)品:U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
HCT116/L細胞系相關產(chǎn)品:PANC 1005細胞、LAC細胞、U-2-OS細胞
EFO27細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
H2052細胞系相關產(chǎn)品:K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
OVCAR-3細胞系相關產(chǎn)品:TE10細胞、SW1417細胞、LN-382細胞
LNCaP subline C4-2細胞系相關產(chǎn)品:Swiss3T3細胞、SK_HEP1細胞、CHO/dhFr-細胞
DI TNC1細胞系相關產(chǎn)品:H-2172細胞、HREC細胞、ATDC5細胞
IM95細胞系相關產(chǎn)品:CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
Ramos 2G6.4C10細胞系相關產(chǎn)品:NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞
SK-MEL-24細胞系相關產(chǎn)品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
AN-3細胞系相關產(chǎn)品:U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞
RGM-1細胞系相關產(chǎn)品:RCC_7860細胞、MDA436細胞、HCC-1143細胞
HPDEC細胞系相關產(chǎn)品:COLO_320DM細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、HRGEC細胞
NTHY-ORI3.1細胞系相關產(chǎn)品:hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞
LU165細胞系相關產(chǎn)品:WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞
Lewis-Lung細胞系相關產(chǎn)品:NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞
RPMI1788細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
H-2066細胞系相關產(chǎn)品:OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞
MARC145細胞系相關產(chǎn)品:FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞
BAC1.2F5細胞系相關產(chǎn)品:LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關產(chǎn)品:HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
HBMEC細胞系相關產(chǎn)品:LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞
BNL CL.2細胞系相關產(chǎn)品:TF1細胞、JURKAT E-6.1細胞、Colo-206F細胞
LS 174T細胞系相關產(chǎn)品:HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
GM03573A細胞系相關產(chǎn)品:Panc 5.04細胞、NOMO1細胞、LLC-PK1細胞
PK15細胞系相關產(chǎn)品:WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞
NIH 3T3細胞系相關產(chǎn)品:AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞
H-711細胞系相關產(chǎn)品:GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
N-87細胞系相關產(chǎn)品:108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
Detroit-562細胞系相關產(chǎn)品:T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞
COR L279細胞系相關產(chǎn)品:LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
SCI1細胞系相關產(chǎn)品:HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞
SKMEL-2細胞系相關產(chǎn)品:M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
UO-31細胞系相關產(chǎn)品:Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞
CMT-93細胞系相關產(chǎn)品:Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
SW-1353細胞系相關產(chǎn)品:AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關產(chǎn)品:SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
PE CA PJ34細胞系相關產(chǎn)品:H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞
NCI-H292細胞系相關產(chǎn)品:FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞
BMU-S1細胞系相關產(chǎn)品:Caco 2細胞、NCI-H1781細胞、SW 982細胞
SCC154細胞系相關產(chǎn)品:Plaepi 34細胞、VM-CUB1細胞、BHT101細胞
EU-4 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
Balb/c 3T3細胞系相關產(chǎn)品:ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞
SJ-RH30細胞系相關產(chǎn)品:SCC-7細胞、H4-II-E細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞
HMC細胞系相關產(chǎn)品:CEM-CCRF (CAMR)細胞、IHC-ST1細胞、SUPT-1細胞
C8166-CD4細胞系相關產(chǎn)品:KRCY細胞、KCL-22細胞、BC-3H-1細胞
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