"MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
細胞背景資料：急性髓系白血??；女性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
HS-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞
CORL26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239A細胞、KMS11細胞、MDAPC2B細胞
VM Cub 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
細胞生長：懸浮
MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞
NUGC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞
HAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
NuTu-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B15細胞、WI 38細胞、Tb 1-Lu細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
WM115-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
HOS (TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
HKBML細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
GM 2132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154B細胞、GI-1細胞、EFM-192A細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
OPM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92MI細胞、OVCAR-420細胞、MSC細胞
ATC241細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞
MDA-MB-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-4細胞、H82細胞、Ra No. 1細胞
MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
COLO 206細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞
OVCAR 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞
NRK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
SW48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
F442-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
F442-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
GA10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
PNT1-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
MSTO-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞
YES 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
MDA MB 134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
HuCC-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞
3T3-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
TE 85 ClF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV細胞、Neuro 2a細胞、NCI-SNU-886細胞
NSI/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2066細胞、Nthy-ori 3.1細胞、alpha TC1 clone 6細胞
CAOV4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
H295R-S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞
J 111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞
GC-1 spg細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H3255細胞、CHL-CL-11細胞、NMC-G1細胞
WM-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞
NTC-200細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
Hs688(A)T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞
SCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
SP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
MDA 231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞
MDA435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞
MAVER-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞
MPC 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLE細胞、H1105細胞、SEG-1細胞
H-510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞
WB F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
NCIH1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
NOMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O細胞、CII細胞、HEK293T/17細胞
NCI-H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞
VeroE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK細胞、SF 767細胞、A-20細胞
MDA-MB-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
HuP-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
CLONE M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞
LAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞
EB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞
R3/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞
OS-732細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
NCIH2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞
G361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞
CAL39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞
COLO 699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞
ChaGo-K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
MOLM-16 Lymphoblastoid cells人急性髓系白血病細胞系
KU-812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞
EFO27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2171細胞、SNU601細胞、Human Liver-7702細胞
EU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0203細胞、H-358細胞、MM96L細胞
Hopkins-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細胞、PC.3細胞、LTPA細胞
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