"OCI-Ly8 Lymphoblastoid cells人彌漫大B淋巴瘤細胞系
細胞背景資料:彌漫大B淋巴瘤
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
H-1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞
細胞生長:懸浮
OCI-Ly8 Lymphoblastoid cells人彌漫大B淋巴瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
MDA175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL28細胞、HN6細胞、MDA-MB-435細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
A10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞
RD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞
ARH 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OCI-Ly8 Lymphoblastoid cells人彌漫大B淋巴瘤細胞系
細胞生長特性:懸浮
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認(rèn)為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
Hs 839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞
HCC1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
H-1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞
CAMA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
L02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1651細胞、NCI-H1435細胞、B958細胞
HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
L615細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
L-6 myoblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
IPLB-Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞
MDA-MB 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞
OCI-Ly8 Lymphoblastoid cells人彌漫大B淋巴瘤細胞系
184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞
SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
R-1059-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
Kasumi-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞
JROECL 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞
L-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
L-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
H-2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞
MAD109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞
BEL/FU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC-2 cl3-43細胞、HBL1細胞、RT-BM細胞
HEK293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細胞、Panc 4.03細胞、L-540細胞
NCI-H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL-68細胞、RC-4B細胞、KHYG細胞
OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞
TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-4細胞、102PT細胞、GalK 1細胞
SL-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞
SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
Oregon J-111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC6細胞、hTERT-HME1細胞、ARIP細胞
J-111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E6細胞、LAD2細胞、HT-22細胞
T-ALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
DoHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSCs(mUCMSCs)細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
GM17219細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM159細胞、BT483細胞、Hs-852-T細胞
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
MC3T3-E1(C4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞
HS688AT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞
NCIH2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞
Clone Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
HS5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞
HT(H9)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞
Capan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞
3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-109細胞、NB-4細胞、BDCM細胞
H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞
PCI:SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞
H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
GM16136細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞
COLO679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞
ESC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y-79細胞、HS-294T細胞、HCe-8693細胞
HT-1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞
HT-1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞
RWPE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞
NCI-H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL-68細胞、RC-4B細胞、KHYG細胞
Clone 166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
Bowes melanoma cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞
G-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞
Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
OCILY10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
SBC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞
HEK-293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞
RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
WSUDLCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HPF-1細胞、TE 32細胞、LAN5細胞
OCI-Ly8 Lymphoblastoid cells人彌漫大B淋巴瘤細胞系
KMM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞
SKO-007細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1833細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、hFOB 1.19細胞
CSQT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Blotchy fibroblast-11細胞、RAW264.7細胞、NCIH322細胞
H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM.1S細胞、THP-1細胞、Ca759細胞
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