"JVM-3 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:慢性髓白血病;女性
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
MOLT 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676B細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞
TE-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOS-3細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞
細(xì)胞生長:懸浮
JVM-3 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細(xì)胞從一個實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個實(shí)驗(yàn)室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來自一個受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開始時一個確定的點(diǎn)G0點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動各不相同。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
NCI-H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2286細(xì)胞、HC11細(xì)胞、FAT細(xì)胞
TM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞、746T細(xì)胞
BE2-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞
8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細(xì)胞、BMDC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞
HN13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBEo細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞、R 1610細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
JVM-3 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
HT 1197.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBSMC細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞
3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞
Hs 766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRVEC細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞
McA-RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞
IMR-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1細(xì)胞、WILL2細(xì)胞、MIN6細(xì)胞
GM05887A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK Type II細(xì)胞、H2196細(xì)胞、CORL51細(xì)胞
HUCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞
KYSE-450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHHCALL2細(xì)胞、LA-N-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞
HPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FF-WT-BJ細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞、RFL6細(xì)胞
WM-266-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2066細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞
JVM-3 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細(xì)胞系
NCI-H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞
LIM-1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0327細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞
NCIH2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-865細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞、143TK-細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
MV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1672細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞
A375-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 746.T細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞
A375-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 746.T細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞
Porcine Kidney-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1048細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞
WRL68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283細(xì)胞、H-2107細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1755細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞
SW954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS81細(xì)胞、MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、HCC15細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
SiHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 620細(xì)胞、HCT8細(xì)胞、A.704細(xì)胞
Human Microglia Clone 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2108細(xì)胞、SCL2細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細(xì)胞、H-2087細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞
GM05887A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK Type II細(xì)胞、H2196細(xì)胞、CORL51細(xì)胞
THLE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human podocyte細(xì)胞、SKMES細(xì)胞、95D細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞
DiFi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL10細(xì)胞、MLM細(xì)胞、8305C細(xì)胞
HuLEC-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-M細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞
NCI-H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCSUP細(xì)胞、H1703細(xì)胞、LYR細(xì)胞
VMRC-RCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-839細(xì)胞、H-358細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞
RA 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 1469細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞、A-704細(xì)胞
J82 COT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-1細(xì)胞、Namalva細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞
RBL 2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2023細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞、C4-2細(xì)胞
Hs_578t細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZC-1細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞
Ramos G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞
H-35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 394細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞
EL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK.2細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞
RKN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu177細(xì)胞、OE33細(xì)胞、ECV304細(xì)胞
MDAMB134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT.T15細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
H-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP-1細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞、CPAE細(xì)胞
Wien 133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞、MNNG細(xì)胞
NCI-HUT-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR-146細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞、H-1869細(xì)胞
RS4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3/M細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞
TR 146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1222細(xì)胞、SNB19細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞
BaF3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV304細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞、H-1437細(xì)胞
MO59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIG3細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞、TE7細(xì)胞
FTC-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C1細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞、NSC34細(xì)胞
H-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102PT細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞
Panc-3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞
SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435細(xì)胞、H-82細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞
Leukemia 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞、U-2OS細(xì)胞
3 LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞、GM03671細(xì)胞
H283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 Bl細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞
SVGp12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2066細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞、TE354T細(xì)胞
H-1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 Secreting細(xì)胞、H125細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞
F98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-CAR細(xì)胞、YES 2細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
C918細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL.2細(xì)胞、HCT-15細(xì)胞、MDA435細(xì)胞
JVM-3 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細(xì)胞系
GH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC090細(xì)胞、HCT15細(xì)胞、293T細(xì)胞
MC57細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19-RIKEN細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞
MHHCALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-24細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞、P-2003細(xì)胞
Hs 766.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH838細(xì)胞、RM1細(xì)胞、RCS細(xì)胞
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