"KBM-7 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:慢性髓原白血病;男性
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類(lèi)脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。
HEL-92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35 Reuber細(xì)胞、SW620細(xì)胞、H-1836細(xì)胞
MDA453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT-6細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞
MDAMB134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R2C細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮
KBM-7 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái),很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來(lái)也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò),細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
SKO-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1833細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞、HKBML細(xì)胞
A375-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6-P2T細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞
Hs 822.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-MC細(xì)胞、CV 1細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞
293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87細(xì)胞、HT-144細(xì)胞、A875細(xì)胞
HCC78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-SH細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞、SW-837細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
KBM-7 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過(guò)程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過(guò)高或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來(lái)表示單位。
Calu-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL-16細(xì)胞、SW-13細(xì)胞、GM06141細(xì)胞
HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞
NCIH2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/Taxo1細(xì)胞、CAOV4細(xì)胞、RKO_AS45細(xì)胞
ONS-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3D4/21細(xì)胞、SC細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞
MCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MONO-MAC 6細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞、LS 513細(xì)胞
CCD1112Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1RGB細(xì)胞、BL6細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞
QG56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSA/T細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞
SW 1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE12細(xì)胞、NB19細(xì)胞、R2C細(xì)胞
Panc_03_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/Taxol細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞、GP293細(xì)胞
NH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-2細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞
KBM-7 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細(xì)胞系
EB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo320細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞
Cloudman S91 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206細(xì)胞、CAL39細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞
Porcine Kidney-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1048細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞
DH-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細(xì)胞、CMT167細(xì)胞、BC-009細(xì)胞
Alexander cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 c18細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞
OCI AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1693細(xì)胞、Hs-688A-T細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞
293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87細(xì)胞、HT-144細(xì)胞、A875細(xì)胞
HT 1080.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Hep1細(xì)胞、HANK細(xì)胞、HFL細(xì)胞
HFL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-SB細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞、H196細(xì)胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞
C1R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞
COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞
PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES1細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞
OB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lieming Xu-2細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞、A2780細(xì)胞
Rin-M-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T3細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞
OVCA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03320細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞、hA549細(xì)胞
BXPC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE-19細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、H-7721細(xì)胞
PE/CA-PJ-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-433細(xì)胞、SUM52細(xì)胞、S-16細(xì)胞
AE 1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞
SUPT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN14B細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞
U-2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT 112細(xì)胞、OLN93細(xì)胞、NS653細(xì)胞
COLO 738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 98 G細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞、P560細(xì)胞
MS 751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA5細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞
NW-MEL-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2(LLc1)細(xì)胞、D324 Med細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞
Reuber H-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STO細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞、PL 5細(xì)胞
SV40-MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC Y細(xì)胞、G519細(xì)胞、149 PT細(xì)胞
Huh7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細(xì)胞、MM96L細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞
MILE SVEN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-A31細(xì)胞、HuH7細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞
SCLC-21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA-1細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞、231-luc細(xì)胞
G 401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9細(xì)胞、HO8910細(xì)胞、HEB細(xì)胞
HCC-9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞、697細(xì)胞
Kit225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞
NIE 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞
LIM 1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細(xì)胞、DF1細(xì)胞、H1573細(xì)胞
X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144mel細(xì)胞、Leydig細(xì)胞、SW-962細(xì)胞
U-138-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-2細(xì)胞、HNSC細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞
CEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1024細(xì)胞、U266S細(xì)胞、H-2342細(xì)胞
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞
HepaRG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞
JTC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞
BEL 7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SVneo細(xì)胞、SW403細(xì)胞、NT-2細(xì)胞
PA-TU-8988S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2286細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-69細(xì)胞、WI38細(xì)胞、H-292細(xì)胞
NCIH841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33-A細(xì)胞、HARAB細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞
BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞
3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞
P3X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 48細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞
Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML3細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞、WM239細(xì)胞
Pa18C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞
NEC-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-10細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞、KTA7細(xì)胞
KBM-7 Lymphoblastoid cells人慢性髓白血病細(xì)胞系
BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149PT細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞
SUM-190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-F1細(xì)胞、MT-2細(xì)胞、H-2291細(xì)胞
OLN-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA 01/04細(xì)胞、LA 4細(xì)胞、SCC4細(xì)胞
NCIH2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/Taxo1細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、A7r5細(xì)胞
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