"AAV-293 Thawing腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
細胞背景資料：我們推薦使用AAV-２９３細胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。 AAV-２９３源自普遍使用的 HEK２９３細胞株，但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK２９３細胞是剪切過的腺病毒５型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細胞。 跟HEK２９３細胞一樣，AAV-２９３細胞反式表達腺病毒E１基因，當共轉(zhuǎn)染三個AAV助質(zhì)粒(一個含ITR的質(zhì)粒，pAAV-RC, 和E１缺失助質(zhì)粒)時，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
AAV-293 Thawing腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
細胞生長：貼壁
如何進行細胞復蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞，計數(shù)，調(diào)整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開超凈臺風機，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復工作臺面。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
AAV-293 Thawing腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
RM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞
UCD-MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞
Saos2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞
SNU368細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-4細胞、GM02219細胞、Detroit562細胞
A-427細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D407細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞、SL-1細胞
U-343-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞
P-388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞
V79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞
H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞
C4-2 Bone metastatic細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-82細胞、SW-527細胞、NBL-7細胞
HEL 92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
OKT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-638細胞、ROS17/2.8細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞
HEL-92-1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
Baby Hamster Kidney 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞
HSC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61 5.3細胞、KG1細胞、OE-21細胞
Hep 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA細胞、MOLM-13細胞、LLC-PK-1細胞
HOS TE 85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
WIL2 Secreting細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞
KPL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
Tn5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞
hFOB 1.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞
B/C3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1672細胞、HMC細胞、HNE3細胞
HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
SuDHL 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa T細胞、H-1876細胞、WTRL1細胞
NCIH196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞
AAV-293 Thawing腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
Clone Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
HNTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞
Hs 578.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞
MOLM-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞
D341MD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI-1細胞、Verda reno細胞、COLO-320-HSR細胞
SJSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞
P3HR1-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
Hs-688A-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP.FGC細胞、ANA1細胞、HTR-8/SV-neo細胞
PLB 985細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞
TF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞
EOC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞
H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞
CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞
C-33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TO 175.T細胞、H23細胞、SN12-PM6細胞
BHK-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞
A2780 CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞
SW 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18Co細胞、UMUC-14細胞、CAOV4細胞
KATO III細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES 23.5細胞、PLC8024細胞、TGW-I-nu細胞
HLE-SRA-01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞
SMMC 7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBNA293細胞、NCIH1792細胞、H2347細胞
HS766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL(2)細胞、HMO6細胞、PZ-HPV-7細胞
SUM-52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞
PLC/PRF/5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞
MC/CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞
SK-LMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE1細胞、MDCC-MSB-1細胞、NCI-SNU-1細胞
VP267細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
HCT_116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
WM-239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞
Med 283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT5A細胞、CHO-Lec1細胞、MS751細胞
MSCs（mUCMSCs）細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
J.E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞
AAV-293 Thawing腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
NCIH2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞
OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
H-1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21細胞、DAKIKI Clone 1細胞、U 266細胞
HPAFII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞
McG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞
C22 (Clara)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192C細胞、HCC1833細胞、NCI/ADRRES細胞
BHK-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞
MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
J774 A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895.T細胞、C-26細胞、OCIAML3細胞
HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
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