"HEK293-F Thawing人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
HEK293-F Thawing人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HEK293-F Thawing人胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長;懸浮生長
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
BC-028細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHC細(xì)胞、H446細(xì)胞、IAR20細(xì)胞
Capan 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-K1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞
H-358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M細(xì)胞、H-2126細(xì)胞、MG-63細(xì)胞
SKRC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2342細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞
HCC1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARIP細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞、MM6細(xì)胞
N-Tera-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-2H3細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞
H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-10細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞
BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞
KPL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1417細(xì)胞、SW626細(xì)胞、BMDC細(xì)胞
B-95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-cell細(xì)胞、CAMA細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞
HuT 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 1細(xì)胞、GM15452細(xì)胞、SW954細(xì)胞
SU 86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞
U251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞
Sc-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS 4;11細(xì)胞、SCI1細(xì)胞、D283MED細(xì)胞
MDAMB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-436細(xì)胞、Z138細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞
HDQ-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT.116細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞
LA795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞
SUIT 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADR細(xì)胞、P-3J細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞
HS766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL(2)細(xì)胞、HMO6細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞
MOLM-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI N87細(xì)胞、Sol8細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞
U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞
U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞
LK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAEC細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞、A1847細(xì)胞
P3 88 D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞
JJN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DrG細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞
HS578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-468細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞、LA-N-6(OAN)細(xì)胞
HEK293-F Thawing人胚腎細(xì)胞系
C-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細(xì)胞、JIMT細(xì)胞、GM-637細(xì)胞
RPMI.8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH250細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞
TKB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip[973]細(xì)胞、GM05862細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞
293/EBNA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_FI細(xì)胞、Ly3細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞
U-2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT 112細(xì)胞、OLN93細(xì)胞、NS653細(xì)胞
OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE10細(xì)胞、SW1417細(xì)胞、LN-382細(xì)胞
MUTZ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞、HITT15細(xì)胞
KMS-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR10細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞、BT細(xì)胞
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞
LM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2-4175細(xì)胞、TCC Sup細(xì)胞、149PT細(xì)胞
H-1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI.8226細(xì)胞、CCC-HSF-1細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞
SKCO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-1E8細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞
HB611細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8/SVneo細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞、HCFB(HCF)細(xì)胞
L-M(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB-1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞、KMM1細(xì)胞
SNU-601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2/D1細(xì)胞、PANC-03-27細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞
SKNEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-LH7細(xì)胞、BV173細(xì)胞、HT3細(xì)胞
HT1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH30SJ細(xì)胞、RL-65細(xì)胞、NK62a細(xì)胞
CCC-HEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF763細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞、WM-266-mel細(xì)胞
EC109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra No. 1細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞、COLO678細(xì)胞
NCI H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112D細(xì)胞、Earles's cells細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞
SGC-996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 604.T細(xì)胞、HCET細(xì)胞、LAN1細(xì)胞
P3-X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞
HEK293-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC154細(xì)胞、H-2170細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞
CEM clone 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞、SW-620細(xì)胞
H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM.1S細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞
Anip 973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞
Ku812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK-2/E6E7細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞、EFM192細(xì)胞
NCIH2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:74Int細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞
HLEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca8113細(xì)胞、AAV293細(xì)胞、DHL5細(xì)胞
H-1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3 LL細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞、IHH4細(xì)胞
AMJ2-C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA1細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞
A204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 102細(xì)胞、KY-270細(xì)胞、TK10細(xì)胞
MFE-280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS3細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞、L- cell細(xì)胞
HEK293-F Thawing人胚腎細(xì)胞系
HCC1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA1800細(xì)胞、S-16細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞
Hepa-RG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞
HTR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2330細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞、V 79細(xì)胞
L-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC116細(xì)胞、TW-039細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞
A375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBMC細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞
CWR22-Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞、Panc203細(xì)胞
M14-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 361細(xì)胞、SW982細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞
NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞
SW 954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-S2細(xì)胞、Mel526細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞
HO-8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、T98G細(xì)胞
MV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE7細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞、RD-2細(xì)胞
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