"QGY-7703 Thawing人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞系來(lái)自35歲女性的肝癌。染色體數(shù)目變化大,異倍體多。免疫熒光間接法AFP陽(yáng)性反應(yīng)。異體移植能力強(qiáng)。亞顯微結(jié)構(gòu)方面,核與細(xì)胞質(zhì)的比例高,大的多形核和多種細(xì)胞器亞顯微結(jié)構(gòu)改變。在ConA作用下凝集。倍增時(shí)間約為20.5小時(shí)。用Northernblot方法,未能檢測(cè)到細(xì)胞中1.3kbLFIRE-1/HFREP-1mRNA的表達(dá)。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
QGY-7703 Thawing人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
養(yǎng)了幾年細(xì)胞,說(shuō)一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法:1)培養(yǎng)細(xì)胞前,可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說(shuō)明書(shū),包括細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同,有的生長(zhǎng)很快,比如說(shuō)MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿,所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中多多摸索了;3)對(duì)于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)了,胰酶消化不能過(guò)久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間,每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況;4)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn):不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍,我待細(xì)胞如初戀。1)不管買的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測(cè)是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢,買個(gè)支原體檢測(cè)的kit定期檢測(cè)一下;3)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個(gè)人衛(wèi)生。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長(zhǎng)滿
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題,客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō),針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因:細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2)細(xì)胞的接種量:接種量過(guò)低,細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng);4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短:時(shí)間過(guò)長(zhǎng),細(xì)胞死亡;時(shí)間過(guò)短,細(xì)胞未完全分離而成團(tuán),細(xì)胞死亡;5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因,做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過(guò)驗(yàn)證;4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大;3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細(xì)胞種;4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
QGY-7703 Thawing人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了,說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi))。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái),這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過(guò)20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
Rat podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239-A細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞、CHL-1細(xì)胞
H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639 V細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞、NOK細(xì)胞
Th17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIN-6細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞
HD11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05887細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞
MADB 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT FET細(xì)胞、KMS18細(xì)胞、KMS18細(xì)胞
NOMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Keio University-19-19細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞
P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、SW13細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞
JurkatE6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256-TC細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞、28SC細(xì)胞
HP615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 8.13細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞、PIG1細(xì)胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3M細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞、MLM細(xì)胞
HELA-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:251MG細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞
NCIH2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞
SK-CO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1734細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞、CV 1細(xì)胞
MDA-MB-134-VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB436細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞
CX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞
SW1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT325細(xì)胞、N-2a細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞
alpha TC1.6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1N1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞、BC-024細(xì)胞
U-937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC 11細(xì)胞、JM細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞
HuP-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-6細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞、EL4細(xì)胞
3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞
H1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞、H-676細(xì)胞
H1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞、H-676細(xì)胞
Karpas422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞、W133細(xì)胞
SHEE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細(xì)胞、SBC5細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞
NCI-H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gerner 7666細(xì)胞、HS-68細(xì)胞、B35細(xì)胞
KM932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-24細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞、HRC-99細(xì)胞
QGY-7703 Thawing人肝癌細(xì)胞系
Ramos.2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa1-6細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞
MDA MB 436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞
OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞
MDCC-MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA10細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞
SU-DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞
Pa14C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD 1細(xì)胞、HL7702細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞
A549/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2029細(xì)胞、SW 948細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞
SK-Mel 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞
LAPC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSAT細(xì)胞、SNU886細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞
NCIH1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2.35細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞
KM H-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1838細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞、AZ521細(xì)胞
P-815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞
D341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A172細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞
SUD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNTEC細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞
BMDC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞
NCIH1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMSC細(xì)胞、D341細(xì)胞、T. T細(xì)胞
Rat-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS18細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞、526細(xì)胞
SW527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R3/1細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞
Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STC-1細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞、H-1882細(xì)胞
NCIH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH 30細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞、3 LL細(xì)胞
C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-024細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞
H-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI164細(xì)胞、PC3M細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞
WSU-DLCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞
WM2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞
MCF7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-5細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞
H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU620細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞
LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞
MRCV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H524細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞、D-283細(xì)胞
NeHepLxHT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2A細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞
ECV304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞、GOS-3細(xì)胞
Panc4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-1細(xì)胞、EB2細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞
UM-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNEC30細(xì)胞、B95.8細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞
CEMx721.174.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細(xì)胞、TE-13細(xì)胞、2BS細(xì)胞
QGY-7703 Thawing人肝癌細(xì)胞系
H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-449細(xì)胞、COLO679細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞
OCI/AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC94細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞、HC11細(xì)胞
TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3B細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞
GM637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly19細(xì)胞、DMS273細(xì)胞、H865細(xì)胞
RIN-m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞
H-2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A253細(xì)胞、VCaP細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞
LA-N-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞
NK92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 450細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞
PaTu-8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305-C細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞、SCC154細(xì)胞
NIH:OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 52E細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞、SR細(xì)胞
NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞
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