"SK-HEP-1 Thawing人肝癌細胞系
細胞背景資料:SK-HEP-1細胞系已被鑒定為內皮來源。該細胞系為異倍體女性人(XX),染色體在亞三倍體范圍內。在裸鼠中,它能形成與肝癌相一致的大細胞癌
細胞形態(tài):上皮細胞樣
SK-HEP-1 Thawing人肝癌細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結】支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,原體感染,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢死去。用泰樂菌素,獸用支原體病的藥,但可用于細胞培養(yǎng),無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度;黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話,可以增加細胞的種板密度,以提高細胞的生存率;真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內無CO2;2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SK-HEP-1 Thawing人肝癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
DH 82細胞系相關產(chǎn)品:A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞
NPA細胞系相關產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
Tn-5細胞系相關產(chǎn)品:MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞
MC3T3細胞系相關產(chǎn)品:P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞
32D clone 3細胞系相關產(chǎn)品:A875細胞、MDA231-LM2細胞、N-9細胞
MCF-7/ADR細胞系相關產(chǎn)品:CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞
NALM-6細胞系相關產(chǎn)品:RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞
CWR22-Rv1細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關產(chǎn)品:U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞
H9細胞系相關產(chǎn)品:8402細胞、TE-10細胞、HEK 293細胞
SK-N-BE(2)-C細胞系相關產(chǎn)品:HOS (TE85)細胞、HCC 2185細胞、PL9細胞
NIH3T3細胞系相關產(chǎn)品:MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞
NCI-128細胞系相關產(chǎn)品:SL1細胞、SW 48細胞、NCIH1651細胞
PL45細胞系相關產(chǎn)品:4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
A-549細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB468細胞、COLO320DM細胞、SK-UT-1細胞
NCI522細胞系相關產(chǎn)品:MDA-kb2細胞、T47-D細胞、RPMI1846細胞
NEC細胞系相關產(chǎn)品:U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
HFB細胞系相關產(chǎn)品:SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
C-Lu-65細胞系相關產(chǎn)品:CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
Plaepi 34細胞系相關產(chǎn)品:MDA PCa 2b細胞、NBL_S細胞、CA922細胞
THLE-2細胞系相關產(chǎn)品:TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
Nb-2細胞系相關產(chǎn)品:C666-1細胞、SK MEL 5細胞、CL40細胞
RAW 264.7細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關產(chǎn)品:B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
TW-039細胞系相關產(chǎn)品:RT-4細胞、102PT細胞、GalK 1細胞
OCI-Ly 7細胞系相關產(chǎn)品:H220細胞、253J-BV細胞、Tsup-1細胞
SK-HEP-1 Thawing人肝癌細胞系
SNU475細胞系相關產(chǎn)品:NCIH661細胞、BEL7402細胞、SJRH30細胞
DHL6細胞系相關產(chǎn)品:KASUMI6細胞、C22細胞、LM(TK-)細胞
LLCMK2細胞系相關產(chǎn)品:L615細胞、Hs888Lu細胞、Hs_578t細胞
SUDHL-6細胞系相關產(chǎn)品:MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
MeT 5A細胞系相關產(chǎn)品:SW1783細胞、IPI-2I細胞、Panc 02.03細胞
GM00215A細胞系相關產(chǎn)品:HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞
Hs 600.T細胞系相關產(chǎn)品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞
NCIH23細胞系相關產(chǎn)品:mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞
KPL-1細胞系相關產(chǎn)品:GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞
MDA231-LM2-4175細胞系相關產(chǎn)品:CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞
UCLA NPA871細胞系相關產(chǎn)品:MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞
IPLB-SF-21-AE細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞
SK_N_FI細胞系相關產(chǎn)品:UMUC1細胞、SUDHL4細胞、HMC-1細胞
FM-88細胞系相關產(chǎn)品:KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞
SKO007細胞系相關產(chǎn)品:L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞
Hs675T細胞系相關產(chǎn)品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
EU-3細胞系相關產(chǎn)品:PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞
NCI-H378細胞系相關產(chǎn)品:WRL-68細胞、RC-4B細胞、KHYG細胞
16HBEo-細胞系相關產(chǎn)品:NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞
SKMEL-2細胞系相關產(chǎn)品:M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
HPMEC細胞系相關產(chǎn)品:Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
PTK 2細胞系相關產(chǎn)品:COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞
NCI-H2228細胞系相關產(chǎn)品:HEM細胞、CaES-17細胞、Jiyoye(P-2003)細胞
LAN-1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞
LCLC-103H細胞系相關產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞
NCI-H2030細胞系相關產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
LL/2細胞系相關產(chǎn)品:MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
KMST-6細胞系相關產(chǎn)品:DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞
Vero from pool #76細胞系相關產(chǎn)品:TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
H.Ep.-2細胞系相關產(chǎn)品:SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞
SU.86細胞系相關產(chǎn)品:TCam-2細胞、IGROV1細胞、HPAF-I細胞
Hs888 Lu細胞系相關產(chǎn)品:NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞
CCD 841 CoN細胞系相關產(chǎn)品:SUD4細胞、DF-1細胞、GM05887A細胞
SK-HEP-1 Thawing人肝癌細胞系
58F細胞系相關產(chǎn)品:BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞
PG [Human lung carcinoma]細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2009細胞、LWnt3A細胞、CL11細胞
KYSE520細胞系相關產(chǎn)品:TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞
P36細胞系相關產(chǎn)品:MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
SKHEP1細胞系相關產(chǎn)品:Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
Danio rerio Gill細胞系相關產(chǎn)品:SKG-3a細胞、343MG細胞、FHs74Int細胞
SUPT-1細胞系相關產(chǎn)品:RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
SKGIIIA細胞系相關產(chǎn)品:Strain L-929細胞、MDAMB415細胞、H1672細胞
PANC 327細胞系相關產(chǎn)品:HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
THLE-2細胞系相關產(chǎn)品:TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
HCFB(HCF)細胞系相關產(chǎn)品:WEHI-231細胞、MG63細胞、OVCAR 420細胞
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