"A-498 Adherent人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長,此時細(xì)胞生長狀態(tài)良好,當(dāng)補液時,需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
A-498 Adherent人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細(xì)胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞,可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長的細(xì)胞用消化法傳代,部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實驗步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺臺面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧;⑤點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
B-cell with DC Morphology細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL2細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞、CA46細(xì)胞
TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-4細(xì)胞、102PT細(xì)胞、GalK 1細(xì)胞
Hs 606.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細(xì)胞、TM3細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-295細(xì)胞、CNE1細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞
M14-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 361細(xì)胞、SW982細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞
H-2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、WC00079細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
A-498 Adherent人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
【凍存細(xì)胞操作】1)選對數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液,計數(shù),使細(xì)胞密度達(dá)5×10(7)/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10%二甲基亞砜(DMSO) 或甘油,可使冰點降低,使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細(xì)檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩?fù)蘇細(xì)胞操作】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達(dá)到10(7)/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10(5)/ml數(shù)量。
MES-SA-Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-39細(xì)胞、3T3細(xì)胞、38C13細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666_DA細(xì)胞、526mel細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞
MDA415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2135細(xì)胞、A 375細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞
C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT4細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞
H-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2 ad細(xì)胞、FHL124細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞
T 84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC83細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞、BCP1細(xì)胞
CP-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-H細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞
NCI-HUT-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:675T細(xì)胞、A 253細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞
EAhy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86_86細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞、huH 1細(xì)胞
C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞
BHT101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-7細(xì)胞、MB231細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞
SKGT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEND細(xì)胞、HCC15細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞
A-498 Adherent人腎癌細(xì)胞系
D-341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT2細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞、RPMI #8226細(xì)胞
BALB/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞、T9細(xì)胞
CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞
CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞
Panc02-H0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-08-13細(xì)胞、Y-1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞
6-10B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ChA-1細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
FHL-124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL3細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞
Hs606細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH7細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-ADR-RES細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞
Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupT1細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、IR983F細(xì)胞
H-1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD15細(xì)胞、H-2135細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞
SK Mel 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Earle's L cells細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞
HEK-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTPA細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞
Human podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L(TK-)細(xì)胞、ECC12細(xì)胞、Daoy細(xì)胞
CFPAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK1細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞、JeKo-1細(xì)胞
Mel624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH847細(xì)胞、CAL 148細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
32D:cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage OL細(xì)胞、LS174細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞
EOC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-10細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞
NR-8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU4細(xì)胞、NK92細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞
MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Ardle 7777細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞
SNK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1882細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞
M-G63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-5細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞
KG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2M17細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞
COR-L26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ 138細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞、JB-6細(xì)胞
RWPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞
RBL.2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞、GM346細(xì)胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞
PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK-2細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞
JROECL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-411N細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞
EJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa-RG細(xì)胞、SNT8細(xì)胞、CORL105細(xì)胞
KYSE450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM 6細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞、KMBC細(xì)胞
Hepatoma-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H522細(xì)胞、Colo320細(xì)胞、B-104細(xì)胞
H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞
H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7701細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞
SUP T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-325細(xì)胞、MT-2細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞
NALM 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-1386細(xì)胞、BT-549細(xì)胞、EC-109細(xì)胞
Y 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA/Dx5細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞
A-498 Adherent人腎癌細(xì)胞系
LC-1Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2172細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞
HOS TE 85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293AD細(xì)胞、LI7細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞
Mink Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1915細(xì)胞、HCC-44細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞
IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞
C4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRc1細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞
QGY7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343細(xì)胞、CX1細(xì)胞、AM細(xì)胞
COLO 394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRPEpiC細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞
MCF7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHG5細(xì)胞、GES-1細(xì)胞、L132細(xì)胞
ST486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK1細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞、CHP100細(xì)胞
Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87-1細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
HLE-B3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK-3細(xì)胞、MKN 7細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞
MDA415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2135細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞、SMA560細(xì)胞
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