"A-498 epithelioid cells人腎癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
CHL-CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE1201細胞、H-2228細胞、H125細胞
4-1st細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞
H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC38細胞、SKMES-1細胞、BC-025細胞
細胞生長：貼壁
A-498 epithelioid cells人腎癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RL-952細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
QGY-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞
NH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
HCC-1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞
SN12CPM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A-498 epithelioid cells人腎癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
NUGC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞
LIXC-002細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞
SKMEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞
HBL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2-OS細胞、VSMC細胞、D324細胞
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
LA795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞
HEY-A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1395細胞、SNU520細胞、CHO cell clone K1細胞
NCIH378細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320-DM細胞、COS-7細胞、EC9706細胞
A-498 epithelioid cells人腎癌細胞系
NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞
CHL-IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞
CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞
SR786細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞
HCC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞
Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞
PLC-8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞
HEK293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
H-676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞
LN-382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：W256細胞、SVGp12細胞、U-266細胞
Panc203細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCH細胞、HCASMC細胞、Human podocyte細胞
H-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞
MEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞
H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞
MCF-7/AdrR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞
Hs 683細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞
RKOE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞
MonoMac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞
SU-DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞
Hs 888.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
SU-DHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞
NCIH2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞
COLO-679細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞
LI7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞
210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞
BDCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML2細胞、Plaepi 34細胞、SUIT-2細胞
HS 1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
Kit225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
HEK 293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
LA 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞
Colo-201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞
H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-14細胞、QGY7703細胞、NE1-E6E7細胞
SW1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞
SK-BR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞
ACC-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
HCC70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1819細胞、KHYG-1細胞、MCF-10 Attached細胞
686LN-M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-2細胞、Dx5細胞、786-O RCC細胞
TGW-I-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞
NUGC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞
SKNMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞
SK-MEL-2-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞
SVGp12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞
HPAEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
M-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞
Scott and White No. 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞
A375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞
HUVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
A-498 epithelioid cells人腎癌細胞系
SK-BR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
NCIH1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC5細胞、NCI-H1238細胞、NCIH1836細胞
HNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、NS-1-Ag4-1細胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S-3細胞、NIH-OVCAR-3細胞、Ly10細胞
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