"BT-474 Adherent人乳腺導管瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當補液時，需避免反復吹打。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
BT-474 Adherent人乳腺導管瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩吞K細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
ECC12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞
PaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
MM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225細胞、Rabbit Kidney 13細胞、C3A細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
OSC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞
RBMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞
HEC-1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
BT-474 Adherent人乳腺導管瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)相關(guān)培養(yǎng)基選購基本指南：如何選擇培養(yǎng)基：經(jīng)常聽到有人問，這種細胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實這個問題的答案可以很簡單，也可以好復雜。為什么這樣說呢?如果這種細胞是購自一些細胞庫，那很簡單，問供應商就行了。或者找到相關(guān)的文獻，作為參考。培養(yǎng)基這么多種，要選擇起來也是個頭疼的事情。除了部分培養(yǎng)基是公開配方的，或者是專門針對某一種細胞的，如昆蟲基本培養(yǎng)基和神經(jīng)祖細胞基礎培養(yǎng)基， 但是大部分液體培養(yǎng)基都是專利配方的，也就是說其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻、讓供應商推薦，然后用自己的細胞做幾次傳代培養(yǎng)來選出最合適的培養(yǎng)基。畢竟實踐出真知。怎么樣才可以買到好的培養(yǎng)基產(chǎn)品：首先，當然需要找對品牌，其次是找對自己所在區(qū)域的品牌代理商，針對自己所養(yǎng)的細胞，咨詢供應商該選用哪種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，這樣就可以買到好的而且適合自己的培養(yǎng)基產(chǎn)品。關(guān)于培養(yǎng)基品牌，目前公司所知道的高校實驗室有些同學在用Corning系列培養(yǎng)產(chǎn)品，也有同學在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的產(chǎn)品。培養(yǎng)基的選擇和使用；MEM：成分簡單，貼壁細胞；DMEM：分高糖型和低糖型；IDMEM：適合細胞密度低，生長困難的細胞。如雜交細胞的篩選，DNA轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)化細胞的篩選培養(yǎng)；RPM１６４０：應用最廣泛的培養(yǎng)基之一。懸浮細胞培養(yǎng)，主要針對淋巴細胞，也適合其他細胞；１９９、１０９培養(yǎng)基：成分齊全，培養(yǎng)效果較好；F１０培養(yǎng)基：適合小鼠及人類二倍體細胞培養(yǎng)；F１２培養(yǎng)基：適合單細胞分離培養(yǎng)及無血清培養(yǎng)；McCoy’s５A培養(yǎng)基：特別適合原代細胞及較難培養(yǎng)細胞的生長。
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞
ACHN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞
HSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578-T細胞、EPC細胞、MPC-11細胞
TE671/RD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB-F344細胞、NCIH345細胞、SNU739細胞
NCIH1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞
M20 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞
B-95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞
3T3-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
HBL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2-OS細胞、VSMC細胞、D324細胞
LL/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
SK-BR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞
Hepa1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞
SCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1048細胞、TE7細胞、SUM-149PT細胞
BT-474 Adherent人乳腺導管瘤細胞系
Ramos-2G6-4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞
P30 OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly1細胞、M-1細胞、SK-MEL-31細胞
SW 1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞
L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
H-650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
32D.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
Melan-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞
Ramos-2G6-4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
PL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
Wien 133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
TCMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞
HT1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH30SJ細胞、RL-65細胞、NK62a細胞
RAW264細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞
OSRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞
H1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4-I細胞、Jurkat細胞、T8細胞
BJA-B-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GES1細胞、OVCAR-10細胞、SLMT-1細胞
SO-Rb 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞
PK(15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞
MDA-MB-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞
SW-1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞
Pfeiffer細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
MDA MB 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞
RS4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞
CEM-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞
D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
WC00044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞
H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
C3H 10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞
M210B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞
Hs870T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞
SMMC-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
J-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞
LTEP-sm 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞
DMS-153細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞
DMS-153細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞
H-1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH77細胞、Anip[973]細胞、THLE-3細胞
HEC-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
GM02132C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞
IOSE-Mar細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞
BT-474 Adherent人乳腺導管瘤細胞系
CAOV4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
WM-266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-966SK細胞、T-HSC細胞、MCF-7/ADR-RES細胞
Leukemia L1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞
H-2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
NCI-H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞
SW.620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞
GAK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞
SuDHL 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin-Darby Canine Kidney細胞、MC-116細胞、DMS153細胞
MDA157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mink Lung細胞、RBL 1細胞、OE-33細胞
HSC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61 5.3細胞、KG1細胞、OE-21細胞
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