"HB611 Adherent人肝母細胞癌細胞系
細胞背景資料:肝母細胞癌;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當(dāng)補液時,需避免反復(fù)吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HB611 Adherent人肝母細胞癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
Caco-2BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 954細胞、SCC-9細胞、NCI-H2141細胞
KOSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞
KE 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
B16-F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞
HEC1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞
AMJ2-C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA1細胞、CHO K1細胞、SGC 7901細胞
細胞生長特性:貼壁
HB611 Adherent人肝母細胞癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當(dāng)然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當(dāng)然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高),其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底,超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈;2)不要頻繁看細胞。對于初學(xué)者而言,養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長;3)不要怕消化。在傳代的時候,初學(xué)者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應(yīng)力相當(dāng)大,對細胞的傷害也是很大的。
NCTC clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞
OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
SKHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
KCL-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞
HNE-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK ES 01細胞、SK 1細胞、HOS-MNNG細胞
SHG 44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞
OV 1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞
KYSE450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
DI TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2172細胞、HREC細胞、ATDC5細胞
NCI H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞
H-716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞
Hs-600-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞
52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞
HB611 Adherent人肝母細胞癌細胞系
BpRcl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV neo細胞、NCI-H508細胞、ARH 77細胞
NCI-SNU-216細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞
HRMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Institute for Medical Research-90細胞、3T3-Swiss細胞、Hs852T細胞
HRMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Institute for Medical Research-90細胞、3T3-Swiss細胞、Hs852T細胞
CTV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞
MM134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
BrCL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM2-4175細胞、HM06.A1細胞、EOL1細胞
HEL-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
BNL-CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞
CATH.a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 12細胞、NCIADRRES細胞、SUP-M2細胞
NTERA2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11TKB細胞、H378細胞、BT-549細胞
TE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
SCL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞
E304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞
KU-812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞
NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
SCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-1細胞、HUT 28細胞、RPMI #1846細胞
DR2R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
MV-1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞
GM00637F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMD-8細胞、H766T細胞、X63-Ag8細胞
WC00097細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0202細胞、MFE-296細胞、SEM細胞
786.O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2347細胞、Caov-3細胞、NCIH1838細胞
NCI-SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞
H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞
VK2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC細胞、H660細胞、C17細胞
RPMI-7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞
C42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU-1細胞、1E8-H細胞、PLA 802細胞
Hs839T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG ATCC細胞、PANC0203細胞、SK-Hep1細胞
SNB.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞
BV-173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 940.T細胞、Mv1.Lu細胞、H676細胞
HCT 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
TOV-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
HuTu-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
NCI-H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
ST細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
MOLT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞
NCIH1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
HSKMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞
PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞
NCI-SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞
HK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞
HB611 Adherent人肝母細胞癌細胞系
UACC 812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞
BTI-TN5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞
Walker256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞
GOS-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞
Granta-519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS13細胞、RPMI 8226/S細胞、SUM 102PT細胞
HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
OCI-Ly01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞
MeT 5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1783細胞、IPI-2I細胞、Panc 02.03細胞
MC3T3-E1 Subclone 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞
HT1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品:190PT細胞、NCIH1395細胞、Tu212細胞
NCIH2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1.0細胞、H209細胞、Nb2a細胞
SKHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細胞、H-1385細胞、P-19細胞
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