"HB611 Adherent人肝母細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:肝母細(xì)胞癌;男性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來(lái),1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng),此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時(shí),需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
HB611 Adherent人肝母細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn):無(wú)菌意識(shí)要強(qiáng):實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺(tái)以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面,并開啟超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面。無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置,其它個(gè)人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以70%乙醇擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無(wú)菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無(wú)菌之實(shí)驗(yàn)物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻(xiàn)可能對(duì)相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞,有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時(shí),我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計(jì)時(shí),一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多,且會(huì)影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對(duì)細(xì)胞的影響。
Caco-2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 954細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞
KOSC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL-104細(xì)胞、SU-DHL2細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞
KE 37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-4細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞
HEC1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2029細(xì)胞、GES1細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞
AMJ2-C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA1細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
HB611 Adherent人肝母細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個(gè)小經(jīng)驗(yàn)可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺(jué)得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時(shí)候,熾熱的空氣進(jìn)入瓶?jī)?nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會(huì)轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來(lái)。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當(dāng)然會(huì)變堿。如果不燒瓶口的話,你會(huì)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會(huì)大大減慢。(當(dāng)然多多少少還是會(huì)有一點(diǎn)越用越堿,因?yàn)槭覝剡€是比冰箱內(nèi)的溫度高),其實(shí)燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會(huì)發(fā)現(xiàn)根本就不會(huì)燒疼。如果有細(xì)菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細(xì)菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國(guó)內(nèi)從來(lái)就不燒瓶口。來(lái)以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底,超凈臺(tái)內(nèi)根本就不點(diǎn)酒精燈;2)不要頻繁看細(xì)胞。對(duì)于初學(xué)者而言,養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細(xì)胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實(shí)際上看細(xì)胞對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有任何好處,特別是對(duì)原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細(xì)胞。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)因子是非常有限的。細(xì)胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長(zhǎng)的因子在其周圍,形成有利于生長(zhǎng)的局部環(huán)境。你跑去看細(xì)胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇?xì)胞,細(xì)胞老是長(zhǎng)不好。老手細(xì)胞一扔好幾天不管,細(xì)胞瘋長(zhǎng);3)不要怕消化。在傳代的時(shí)候,初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過(guò)度,早早地終止消化。細(xì)胞沒(méi)下來(lái)就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來(lái),用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r(shí)候,37度消化過(guò)夜,細(xì)胞也沒(méi)事。我一般是等細(xì)胞完全變圓后才中止消化。細(xì)胞輕輕一晃就能下來(lái)。還有,動(dòng)作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時(shí)的機(jī)械應(yīng)力相當(dāng)大,對(duì)細(xì)胞的傷害也是很大的。
NCTC clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB157細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞
OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO-11細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞
SKHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞
KCL-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、MKN28細(xì)胞、SaOS細(xì)胞
HNE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK ES 01細(xì)胞、SK 1細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞
SHG 44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD-LM-2細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞
OV 1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞、RL細(xì)胞
KYSE450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM 6細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞、KMBC細(xì)胞
DI TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2172細(xì)胞、HREC細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞
NCI H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 38細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞
H-716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc04.03細(xì)胞、BT-20細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞
HB611 Adherent人肝母細(xì)胞癌細(xì)胞系
BpRcl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV neo細(xì)胞、NCI-H508細(xì)胞、ARH 77細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
HRMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Institute for Medical Research-90細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞
HRMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Institute for Medical Research-90細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞
CTV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、NEC細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞
MM134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞
BrCL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM2-4175細(xì)胞、HM06.A1細(xì)胞、EOL1細(xì)胞
HEL-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 737.T細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞
C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSF細(xì)胞、SW-962細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞
BNL-CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-MEL-38細(xì)胞、HSF細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞
CATH.a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 12細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞
NTERA2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11TKB細(xì)胞、H378細(xì)胞、BT-549細(xì)胞
TE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO_AS45細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞
SCL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 1469細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞
E304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR-786細(xì)胞、3LL細(xì)胞、U138細(xì)胞
KU-812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E304細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞
NCIH2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞
SCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞
DR2R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J細(xì)胞、50.B1細(xì)胞、Tregs細(xì)胞
MV-1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞
GM00637F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMD-8細(xì)胞、H766T細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞
WC00097細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0202細(xì)胞、MFE-296細(xì)胞、SEM細(xì)胞
786.O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2347細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞
NCI-SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-BL6細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞、L2細(xì)胞
H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAC1細(xì)胞、mREC細(xì)胞、HEC151細(xì)胞
VK2/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC細(xì)胞、H660細(xì)胞、C17細(xì)胞
RPMI-7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T HEECs細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞、Hs281T細(xì)胞
C42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU-1細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞
Hs839T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG ATCC細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞
SNB.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK2細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞
BV-173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 940.T細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞、H676細(xì)胞
HCT 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 434細(xì)胞、NCIH2170細(xì)胞、MSTO211H細(xì)胞
TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞
HuTu-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞
NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞
ST細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
NCIH1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC1-SPG細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞
HSKMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166-CD4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、SIRC細(xì)胞
PaTu-8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305-C細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞、SCC154細(xì)胞
NCI-SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-78細(xì)胞、MGSMC細(xì)胞、MH7A細(xì)胞
HK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 10細(xì)胞、2E8細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞
HB611 Adherent人肝母細(xì)胞癌細(xì)胞系
UACC 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-952細(xì)胞、VMM5細(xì)胞、Tu212細(xì)胞
BTI-TN5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞
Walker256-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239細(xì)胞、SW-954細(xì)胞、HN4細(xì)胞
GOS-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞
Granta-519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS13細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞
HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞
OCI-Ly01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞
MeT 5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1783細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞、Panc 02.03細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、FLS細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞
HT1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:190PT細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞、Tu212細(xì)胞
NCIH2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1.0細(xì)胞、H209細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞
SKHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細(xì)胞、H-1385細(xì)胞、P-19細(xì)胞
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