"HB611 Cell:人肝母細胞癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:肝母細胞癌;男性 SUDHL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞 FHCRC subclone 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3細胞、OCM-1A細胞、ARO81細胞 OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞 HRGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 HB611 Cell:人肝母細胞癌細胞系 細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 如何進行細胞復(fù)蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調(diào)整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)?!緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復(fù)蘇的時候,有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MDA-MB-231-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞 786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞 CCC-HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞 NCI-H2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞 HBL100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB985細胞、Mel RM細胞、SU-DHL-10細胞 細胞生長特性:貼壁 HB611 Cell:人肝母細胞癌細胞系 細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項:1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈,消毒半小時以上。2.進入凈化室前先關(guān)閉紫外燈,打開超凈臺風(fēng)機,等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風(fēng)淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。8.水平式風(fēng)機的超凈臺,應(yīng)使瓶口斜置,應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個不同的細胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復(fù)工作臺面。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞 KTA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞 Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞 HT-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞 AKR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞 Tu-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞 SW579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞 HB611 Cell:人肝母細胞癌細胞系 LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞 Dunn LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:343MG細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、BMSCs(mBMSCs)細胞 CAL39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞 UT-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞 NCIH1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞 MESSA-DX5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞 T24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22S細胞、GA-10細胞、UCLA-RO 81細胞 7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞 NCI-H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞 NCI-H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞 WM239細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03320D細胞、SNU-423細胞、TU 686細胞 Tu686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞 HCC 2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞 MGH-U1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML2細胞、IM-9細胞、GM02219C細胞 CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞 Hs 343.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TN5B14細胞、HKC細胞、V79-1細胞 L-540細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞 IGROV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞 RCC_7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞 NCI-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞 HCT-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-I-nu細胞、HS 1.Tes細胞、HCET細胞 ST-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞 PFSK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞 H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞 PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞 HCC-4006細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU869細胞、H-841細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞 NPA87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞 Ramos-RA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞 OVCA 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞 Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞 NCIH2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoHH-2細胞、RH-30細胞、GP2-293細胞 NCI-H1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞 GM03570細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞 Dami細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞 Hk-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞 NUGC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞 SUP-B15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92.05細胞、PC-3M 2B4細胞、Hs 742.T細胞 7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞 SNU423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞 IGROV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞 IGROV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞 Alpha Mouse Liver 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞 CHG-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1573細胞、A375.S2細胞、CL 1-5細胞 HB611 Cell:人肝母細胞癌細胞系 SNU-216細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-L細胞、JVM-3細胞、M-NFS-60細胞 AZ521細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞 H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞 Emory University-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞 Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞 RMG-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞 293/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞 SHG44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293S細胞、SGC-7901/DDP細胞、T24(ECV304)細胞 CEM/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞 JURKAT E-61細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-4細胞、WM-2664細胞、HNEpC細胞 HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞 Baby Hamster Kidney-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC-11細胞、OCI-AML-3細胞、H196細胞 "
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