"PG-BE1 Adherent人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:肺巨細(xì)胞癌
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時(shí)搖勻,但在細(xì)胞貼壁前,又移動(dòng)了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動(dòng)或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)不均勻。研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。運(yùn)輸過程對(duì)細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C 太久。一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下,很可能會(huì)出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)的現(xiàn)象,聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細(xì)胞,因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)胞時(shí)需控制好細(xì)胞密度。如果出現(xiàn)了細(xì)胞團(tuán),可以通過細(xì)胞篩去掉部分較大的細(xì)胞團(tuán),也可以嘗試一下方法:將細(xì)胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細(xì)胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細(xì)胞團(tuán))。部分細(xì)胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個(gè)是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細(xì)胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時(shí)間等方法來調(diào)整細(xì)胞狀態(tài);如果大部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡,且單個(gè)細(xì)胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細(xì)胞代次較高,細(xì)胞老化所致,需更換代次較早的細(xì)胞。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PG-BE1 Adherent人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn):無菌意識(shí)要強(qiáng):實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺(tái)以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置,其它個(gè)人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻(xiàn)可能對(duì)相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞,有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時(shí),我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計(jì)時(shí),一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多,且會(huì)影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對(duì)細(xì)胞的影響。
HCC1954-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-A細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞
Hs683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-F細(xì)胞、LK 2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞
H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、N87細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KBM-7/Hap8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP3B2細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞
EOC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)n細(xì)胞、HRMC細(xì)胞、CORL23細(xì)胞
MLE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA361細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞、TMK1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
PG-BE1 Adherent人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
幾種實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基成分的作用:1)NaHCO3的作用是什么?與CO2一起形成緩沖系統(tǒng),保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定;2)酸鈉的作用是什么?酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是如果沒有葡萄糖的話,細(xì)胞也可以代謝酸鈉。酸鈉的貯存液濃度一般為50mM,-20℃保存,培養(yǎng)基中的終濃度為1mM;3)加入HEPES有何好處?培養(yǎng)基中最常用的Buffer system是碳酸鹽,它可提供營(yíng)養(yǎng),但卻在生理PH值條件下會(huì)降低緩沖能力。而HEPES是一種很強(qiáng)的Buffer,加入HEPES能使細(xì)胞培養(yǎng)基在PH7.2-7.6條件下緩沖能力增強(qiáng)。Hepes的貯存液濃度一般為1M,常溫保存。培養(yǎng)基中的終濃度為25mM,即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培養(yǎng)基中;4)紅的作用是什么?紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色;5)谷酰胺的作用是什么?幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷酰胺都有膠高的要求。谷酰胺脫掉基后,可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源,參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷酰胺時(shí),細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20℃冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷酰胺的液體培養(yǎng)基4度冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí),應(yīng)重新加入原來量的谷酰胺。試驗(yàn)操作中常配制高濃度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支),分裝使用,-20℃保存。使用時(shí),每支1ml的谷酰胺加入到99ml完全培養(yǎng)基中,使其終濃度為2mM培養(yǎng)基。
LA 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA-VSMC細(xì)胞、Fao細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞
CHO-ori細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL 62891細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞
HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞
OV1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-30細(xì)胞、Colon38細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞
SBC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2A細(xì)胞、KLE細(xì)胞、RD細(xì)胞
MTEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1833細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞、HS-294細(xì)胞
3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞
SW 839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL 4細(xì)胞、TT細(xì)胞、FU-97細(xì)胞
HS-695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV29細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞
CHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-2細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞
MGH-U1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML2細(xì)胞、IM-9細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞
YH-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEp-2細(xì)胞、NT2細(xì)胞、SHEE細(xì)胞
INS-1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AA-Mel細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞、PL-45細(xì)胞
PG-BE1 Adherent人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系
L Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK1細(xì)胞、FRO細(xì)胞、Ball 1細(xì)胞
MDA-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOAS451細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞
LUDLU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9204細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞
MPC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞
NIH:OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca9-22細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞
T241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo 1細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞、MRC5細(xì)胞
786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA 560細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞
RKOAS451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、H-2141細(xì)胞、H-820細(xì)胞
HuH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-C7細(xì)胞、4-1st細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞
HNSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCASMC細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞、HEL細(xì)胞
ARO-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT-26細(xì)胞、RCC4細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞
HT29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 962細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞
MAVER-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-193細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞
MDA-MB-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞、SCC090細(xì)胞
N1S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera2 cl.D1細(xì)胞、373MG細(xì)胞、RCF細(xì)胞
C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-024細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞
H341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTEC1細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞
HHUA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266BL細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞
Ramos (RA)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、H19-7細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞
KMH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly1細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞
MKN28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞
DMS-114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB-231細(xì)胞、253J細(xì)胞、293AD細(xì)胞
22Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA.MB.231細(xì)胞、GM04680細(xì)胞、UT-7細(xì)胞
Co320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOMEC細(xì)胞、H-508細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞
KYSE180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC-96細(xì)胞、SU4細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞
FHs74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRC-99細(xì)胞、Med 283細(xì)胞、LO2細(xì)胞
PLA-801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞
KYSE-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs604T細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞、SW 620細(xì)胞
H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFSF細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、HBE細(xì)胞
SK-N-BE(1)n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC34細(xì)胞、H-2023細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞
MDA MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255_DA細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、HFF-1細(xì)胞
Sci-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip-973細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞
BHK 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-1細(xì)胞、LLC細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞
MDA-MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 116細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞
NCIH522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞
Karpas-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCM細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞
NUGC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL-2細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞
NCI-SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞
LS 174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 445T細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L 540細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞
OsACL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、LU65細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞
HEK-293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、Caki2細(xì)胞、GES-1細(xì)胞
PG-BE1 Adherent人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系
Hs 742.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細(xì)胞、H-1435細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞
MHCC97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞
SK-RC 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 13細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞、USMC細(xì)胞
LK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3396細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞
NCIN87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1876細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞
GA-10-Clone-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U3細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞、SKLMS-1細(xì)胞
32D-Cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FT-293細(xì)胞、Co 115細(xì)胞、H1581細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞
KNS-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞
SK.MEL.28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1770細(xì)胞、AU-565細(xì)胞、U87MG細(xì)胞
H-2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-12細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞
Hi5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JC細(xì)胞、SCC154細(xì)胞、QBC939細(xì)胞
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