"PG-BE1 Adherent人肺巨細胞癌高轉移細胞系
細胞背景資料:肺巨細胞癌
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正常現(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細胞狀態(tài)不佳,可以通過調整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡,且單個細胞內空泡數(shù)目偏多,則可能細胞代次較高,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PG-BE1 Adherent人肺巨細胞癌高轉移細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
HCC1954-BL細胞系相關產品:HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
Hs683細胞系相關產品:293-F細胞、LK 2細胞、Line 697細胞
H2228細胞系相關產品:Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KBM-7/Hap8細胞系相關產品:HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞
EOC 20細胞系相關產品:SK-N-BE(1)n細胞、HRMC細胞、CORL23細胞
MLE-12細胞系相關產品:MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
細胞生長特性:貼壁
PG-BE1 Adherent人肺巨細胞癌高轉移細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
幾種實驗室細胞培養(yǎng)基成分的作用:1)NaHCO3的作用是什么?與CO2一起形成緩沖系統(tǒng),保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定;2)酸鈉的作用是什么?酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是如果沒有葡萄糖的話,細胞也可以代謝酸鈉。酸鈉的貯存液濃度一般為50mM,-20℃保存,培養(yǎng)基中的終濃度為1mM;3)加入HEPES有何好處?培養(yǎng)基中最常用的Buffer system是碳酸鹽,它可提供營養(yǎng),但卻在生理PH值條件下會降低緩沖能力。而HEPES是一種很強的Buffer,加入HEPES能使細胞培養(yǎng)基在PH7.2-7.6條件下緩沖能力增強。Hepes的貯存液濃度一般為1M,常溫保存。培養(yǎng)基中的終濃度為25mM,即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培養(yǎng)基中;4)紅的作用是什么?紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色;5)谷酰胺的作用是什么?幾乎所有的細胞對谷酰胺都有膠高的要求。谷酰胺脫掉基后,可作為培養(yǎng)細胞的能量來源,參與蛋白質的合成和能量代謝。在缺少谷酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應置-20℃冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷酰胺的液體培養(yǎng)基4度冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的谷酰胺。試驗操作中常配制高濃度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支),分裝使用,-20℃保存。使用時,每支1ml的谷酰胺加入到99ml完全培養(yǎng)基中,使其終濃度為2mM培養(yǎng)基。
LA 4細胞系相關產品:T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞
CHO-ori細胞系相關產品:FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞
HIBEC細胞系相關產品:NCI-BL1339細胞、DOK細胞、NG-108-15細胞
OV1063細胞系相關產品:KYSE-30細胞、Colon38細胞、KMS-18細胞
SBC5細胞系相關產品:NCI-SNU-C2A細胞、KLE細胞、RD細胞
MTEC1細胞系相關產品:HCC-1833細胞、Vero 76 clone E6細胞、HS-294細胞
3T3J2細胞系相關產品:UMRC2細胞、CAL-39細胞、HEK-293-FT細胞
SW 839細胞系相關產品:EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
HS-695T細胞系相關產品:HCV29細胞、SCC 25細胞、L M (TK-)細胞
CHO細胞系相關產品:MT-2細胞、EVSAT細胞、HECCL-1細胞
MGH-U1細胞系相關產品:OCI-AML2細胞、IM-9細胞、GM02219C細胞
YH-13細胞系相關產品:HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞
INS-1E細胞系相關產品:AA-Mel細胞、Ramos (RA)細胞、PL-45細胞
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L Wnt-3A細胞系相關產品:HANK1細胞、FRO細胞、Ball 1細胞
MDA-436細胞系相關產品:RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞
LUDLU 1細胞系相關產品:HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞
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Ramos (RA)細胞系相關產品:BALB/3T3 clone A31細胞、H19-7細胞、Nb-2細胞
KMH-2細胞系相關產品:OCI-Ly1細胞、SJRH-30細胞、aTC1 Clone 6細胞
MKN28細胞系相關產品:TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
DMS-114細胞系相關產品:MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
22Rv1細胞系相關產品:MDA.MB.231細胞、GM04680細胞、UT-7細胞
Co320細胞系相關產品:HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞
KYSE180細胞系相關產品:RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞
FHs74 Int細胞系相關產品:HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞
PLA-801D細胞系相關產品:THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞
KYSE-50細胞系相關產品:Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞
H1648細胞系相關產品:HFSF細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、HBE細胞
SK-N-BE(1)n細胞系相關產品:NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
MDA MB 361細胞系相關產品:H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞
Sci-1細胞系相關產品:Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
BHK 21細胞系相關產品:NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞
MDA-MB 231細胞系相關產品:HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞
NCIH522細胞系相關產品:Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞
Karpas-299細胞系相關產品:HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞
NUGC-4細胞系相關產品:WSU-DLCL-2細胞、CF-1 MEF細胞、Be-Wo細胞
NCI-SNU-C1細胞系相關產品:SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
LS 174T細胞系相關產品:HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關產品:KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞
OsACL細胞系相關產品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
HEK-293 c18細胞系相關產品:brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞
PG-BE1 Adherent人肺巨細胞癌高轉移細胞系
Hs 742.T細胞系相關產品:High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞
MHCC97-H細胞系相關產品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞
SK-RC 42細胞系相關產品:SW 13細胞、Hs 870.T細胞、USMC細胞
LK2細胞系相關產品:H3396細胞、PaTu 8988 S細胞、PC-3M 2B4細胞
NCIN87細胞系相關產品:H1876細胞、NCIH841細胞、NCI-H2405細胞
GA-10-Clone-4細胞系相關產品:MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞
32D-Cl3細胞系相關產品:FT-293細胞、Co 115細胞、H1581細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關產品:MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
KNS-62細胞系相關產品:UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞
SK.MEL.28細胞系相關產品:H-1770細胞、AU-565細胞、U87MG細胞
H-2087細胞系相關產品:PL-12細胞、LM2-4175細胞、PK (15)細胞
Hi5細胞系相關產品:JC細胞、SCC154細胞、QBC939細胞
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