"RIN-m5F Adherent大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胰島β細(xì)胞瘤；雄性；NEDH
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RIN-m5F Adherent大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
HL-60 clone15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLOY4細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞
SL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates-1B細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞、TFK1細(xì)胞
UCW 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細(xì)胞、SW839細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCM356細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK II細(xì)胞、REC1細(xì)胞、AK細(xì)胞
NCI-H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞
MOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
RIN-m5F Adherent大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
LS411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞
GM00637H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A101D細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞、IM-95細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞
L-132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL851細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞
M-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW626細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞
Kelly細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSC19細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞
CAL-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7404細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞
SK-GT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-407細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、H-774細(xì)胞
H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 299細(xì)胞、87MG細(xì)胞、MA 104細(xì)胞
NCI-SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-330細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞、EOC20細(xì)胞
Colon-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM/0細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞
DU 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞
hUC-MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞
RIN-m5F Adherent大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
J774.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS114細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞
BEL7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、2PK3細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞
MDA-MB-175VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2108細(xì)胞、SF767細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞
MDA-MB-175VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2108細(xì)胞、SF767細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞
WM451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB 17細(xì)胞、EFM19細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞
YAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-2細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞
TE 671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC15細(xì)胞、RT4細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞
ROS-17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA2B細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞
GES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCET細(xì)胞、PC-14細(xì)胞、GI-1細(xì)胞
TK-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 03.27細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞、Hep2細(xì)胞
RGC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7666細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞
SK-LU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 3細(xì)胞、LN 382細(xì)胞、211H細(xì)胞
SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞
SW-1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMO-1細(xì)胞、C17細(xì)胞、PL45細(xì)胞
SW-1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMO-1細(xì)胞、C17細(xì)胞、PL45細(xì)胞
H-1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HIE-2細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞
TKB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip[973]細(xì)胞、GM05862細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞
H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2BBe細(xì)胞、MBVP細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞
HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞
LIXC-002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B4G12細(xì)胞、MRC9細(xì)胞、M059J細(xì)胞
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04671細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞、CW2細(xì)胞
NCI/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM-88細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞、L-cell細(xì)胞
HDQP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tissue Culture-1細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞
LNCaP subline C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss3T3細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞
LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞
H8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞
NCI-H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalwa細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞
MDA MB 436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞
H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞
Farage Original Line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-Van細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞
L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC3細(xì)胞、M619細(xì)胞、MKN 28細(xì)胞
SNU387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3L1細(xì)胞、SNU739細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞
H-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞、GB-1細(xì)胞
TO175T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT167細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞
786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞
KYSE-150細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B細(xì)胞、74Int細(xì)胞、Ly1細(xì)胞
UWB1289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2780 CP細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞、NCIH2081細(xì)胞
YH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL-20細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞
IEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-EBNA細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞、ME-180細(xì)胞
H-2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML4細(xì)胞、HCC827細(xì)胞、H-128細(xì)胞
PG-4(S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F36P細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞、VCaP細(xì)胞
Med 283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT5A細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞、MS751細(xì)胞
RIN-m5F Adherent大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞
ECC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116細(xì)胞、AM-38細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞
IOSE-Mar細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-A細(xì)胞、GM02132細(xì)胞、SEG1細(xì)胞
NCIH211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞
SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞
NCI-N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞
GOS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH660細(xì)胞、H-28細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞
LS-123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 739.T細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、TE-13細(xì)胞
OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon26細(xì)胞、143 B細(xì)胞、LS123細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB-49細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、EM3細(xì)胞
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