"RIN-m5F Cell:大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:胰島β細(xì)胞瘤;雄性;NEDH
Anglne細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COC1/CDDP細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞、GM03573細(xì)胞
Bac1 2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8.653細(xì)胞、PanC1細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞
RGC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-295細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞
NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細(xì)胞、293 F細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
RIN-m5F Cell:大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞消化過(guò)程總結(jié):其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了,說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái),這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過(guò)20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過(guò)5min,即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
J-774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞
NCI-H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GRSL細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞
V-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-5細(xì)胞、H9細(xì)胞、SKM1細(xì)胞
GM02219D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMa-bm細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞
H22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 70細(xì)胞、Y3Ag1.2.3細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
RIN-m5F Cell:大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
MSTO-211 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1666細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞
G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞
Natural Killer-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL15細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞、H-865細(xì)胞
Walker-256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞
CEM clone 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞、SW-620細(xì)胞
KM.12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS細(xì)胞、GM02131細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞
ROS 17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-427細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Ly19細(xì)胞
RIN-m5F Cell:大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
J774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D:cl3細(xì)胞、UCLA-SO-14細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞
hA549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT16細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞
A172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 8細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞、RPMI-7951細(xì)胞
Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細(xì)胞、H-69細(xì)胞、KATO III細(xì)胞
NCI-H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134VI細(xì)胞、OV3121細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞
HOP 92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr/S細(xì)胞、624mel細(xì)胞、DI-TNC1細(xì)胞
HELF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAR-T細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞
HL7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAFII細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞、H-1373細(xì)胞
H-2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細(xì)胞、SCL II細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞
H-2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細(xì)胞、SCL II細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞
LIM1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞
HTori 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.653細(xì)胞、MEC1細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞
Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞
hTERT-RPE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA'87細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞、Adeno-293細(xì)胞
CCD19-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCD-MLA-144細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞
RPMI-8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuperTube細(xì)胞、ABE8.1/2細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
HCC1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞、A-673細(xì)胞
MDAMB175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1018細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞、H292細(xì)胞
TE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC316細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞
BJA-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3Ag1.2.3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞、BC-020細(xì)胞
U-251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1116細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞
IOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞
brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH-6細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞
J-774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞
WEHI3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294T細(xì)胞、RPMI-7951細(xì)胞、SGC7901/DDP細(xì)胞
Z310細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI660細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞
HuH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-8細(xì)胞、DHL10細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞
H-865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5細(xì)胞、A20細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞
OCI-Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THPI細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375SM細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞
HLEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca8113細(xì)胞、AAV293細(xì)胞、DHL5細(xì)胞
Epstein-Barr-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T-15細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞
GOTO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTC-TT細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞
OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU-65M細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞、H-2030細(xì)胞
NK92-MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP 89細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞
KCL22S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、SHG-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞
NCIH250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH322細(xì)胞、8305-C細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞
Hs 729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Hep1細(xì)胞、YES-2細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞
D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞
Tn5 B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL51細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞、B-3細(xì)胞
L-WRN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞、CW-2細(xì)胞
SW-1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N-1細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞
RIN-m5F Cell:大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
AML 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225 K6細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞
293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞
CHOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC20細(xì)胞、R 1610細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞
SK.MEL.28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1770細(xì)胞、U-251細(xì)胞、Z138細(xì)胞
J82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y1細(xì)胞、SW-480細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞
2B4-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNF1細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞、GM04680細(xì)胞
NCIH196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES 2細(xì)胞、AZ521細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞
HBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52細(xì)胞、IHH細(xì)胞、H526細(xì)胞
CALU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637I細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞
EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞
H-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞
U266-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0403細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、BJAB細(xì)胞
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