"EO771 Adherent小鼠髓樣乳腺癌細胞系
細胞背景資料:惡性乳腺癌;雌性;C57BL/6
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
EO771 Adherent小鼠髓樣乳腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
SU.86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
CMT-167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
Mc Coy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A2780-CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.T細胞、NG10815細胞、KM-H2細胞
VM-CUB-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN-3細胞、HFL 1細胞、HOS(TE85)細胞
MDAMB361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞
細胞生長特性:貼壁
EO771 Adherent小鼠髓樣乳腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
WEHI-279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞
P36細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
SW 1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞
NK-92 MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞
K7M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569D細胞、Pro-Lec1.3C細胞、NCI-H1092細胞
RPMI-1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
HUVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
RERF-LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1882細胞、MAntle cell VERona-1細胞、BLO-11細胞
KMS-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞
RAOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS62細胞、WSU-HN13細胞、H-1355細胞
EC-9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-s細胞、BaF3細胞、G292細胞
M-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞
P3JHR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞
EO771 Adherent小鼠髓樣乳腺癌細胞系
SK-GT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞
RPMI1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
LAN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞
HT 1197.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBSMC細胞、RMS 13細胞、KNS-42細胞
IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly3細胞、HBVSMC細胞、OPM-2細胞
HuCC-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞
NCI-BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO31細胞、H3255_DA細胞、HO8910/PM細胞
F98細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞
HTori-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞
NCIH510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-9細胞、HCT GEO細胞、SNU-886細胞
JHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞
KTC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞
ETCC007細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞
F-36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞
AR4-IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3 HeLa細胞、Scott and White No. 13細胞、Rat Fetal Lung-6細胞
JEG-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295R細胞、GM02131A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞
NCIH1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1573細胞、OCIAML5細胞、MDCC-MSB1細胞
NCI.H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞
Epstein-Barr-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HK2細胞、MLTC-1細胞、SKMES細胞
NCIH226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
A-172MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
Panc 5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WBF344細胞、CA-OV-3細胞、MESSA Dx5細胞
rRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC-8細胞、751-NA細胞、U 937細胞
MC3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞
MCF.10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
MCF.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP1細胞、HCEC細胞、AGS細胞
3D4/21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D CL3細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞、TFH細胞
NCI-H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 684細胞、D6P2T細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞
95C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT474細胞、Lu-99A細胞、UO.31細胞
HCC1171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞
DMS114細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
Hs 688(A).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
HSC-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞
MDA 1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞
BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞
BCECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC403細胞、MCF-7/ADR-RES細胞、MDA-MB 468細胞
KM933細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
NCI H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
EO771 Adherent小鼠髓樣乳腺癌細胞系
U-118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP4細胞、Hs611T細胞、NB-9細胞
OCI-LY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞
Okayama University Medical School-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EHEB細胞、HT 1080.T細胞、2008細胞
Tn5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞
Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
RCC 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
751-NA-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞
P815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞
NCI-H1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-1034細胞、ssMCF7細胞、TGHAVSMC細胞
MFE-280細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS3細胞、Calu 6細胞、Panc08.13細胞
Rat 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4IP細胞、U251-MG細胞、HS940細胞
SW 1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細胞、HFL-1細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
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