"DAN-G Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胰腺癌；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
DAN-G Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞
38C13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞
HT 1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1A細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-12細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞
CT26WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞
SW 1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239A細(xì)胞、PF382細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
DAN-G Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞
NCI-BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO31細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞
H-1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-28細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞、PT67細(xì)胞
MES 23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2A細(xì)胞、Mono Mac6細(xì)胞、P3/ag細(xì)胞
RFL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC2B細(xì)胞、PG13細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞
MHCC-LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28I2細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞
P388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1細(xì)胞、H-378細(xì)胞、NH-6細(xì)胞
NS-1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H661細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞
U118細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-2細(xì)胞、GM17346細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞
C2BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-510細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞、130T細(xì)胞
RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS-1細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞
NPC-TW 039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞、CAL51細(xì)胞
RA.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TT細(xì)胞、H-1092細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞
DAN-G Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
H-1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB.19細(xì)胞、H-35細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞
NCIH196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES 2細(xì)胞、AZ521細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞
KU812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：639V細(xì)胞、B35細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞
SK-Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma 22細(xì)胞、YH細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞
OCI-Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9724細(xì)胞、C-643細(xì)胞、LoVo細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AGS細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞
MOLM-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH8994細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞、L-428細(xì)胞
Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞
ACC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH226細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞
3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞
HUSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-847細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞
OCILY19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB 1.19細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞
PC-3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞
APRE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu-80細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞
CHG-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1573細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞
SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO.205細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞、W256細(xì)胞
H2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-562細(xì)胞、P560細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞
RS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2-D1細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞
Ramos細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL51細(xì)胞、PC-9細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞
SN12C-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-5細(xì)胞、SK-N-FI細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞
GM02219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMY1022細(xì)胞、KP-2細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞
SNU620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H196細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞、DU-145細(xì)胞
SCI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞、PIGI細(xì)胞
ST2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R D細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞、Hs675細(xì)胞
HLE-SRA-01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2.03細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞
GS-9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-028細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞、OAW42細(xì)胞
HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞、SNK1細(xì)胞
MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞
HIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-157細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞
LNCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y79細(xì)胞、CCK81細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞
HLF-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW01細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞
HCET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H295R細(xì)胞、FM88細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞
HSC-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69細(xì)胞、Co 205細(xì)胞、HKC細(xì)胞
MiaPaca.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU1細(xì)胞、L-428細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞
AML-EOL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS1細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞
HBZY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-3細(xì)胞、HSC1細(xì)胞、P-388細(xì)胞
H-1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI.8226細(xì)胞、CCC-HSF-1細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞
H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676細(xì)胞、L cells細(xì)胞、EL 4細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
HOS-143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL6A/C1細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞
DAN-G Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
H-2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anglne細(xì)胞、WM-239細(xì)胞、TCC Sup細(xì)胞
TOV21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞、SNU398細(xì)胞
CV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 1112SK細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞
WM 2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-9細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞、MV411細(xì)胞
HCE-2 [50.B1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-401細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞
GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞
H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-14細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞
SuDHL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa T細(xì)胞、H-1876細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞
H-1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1-Lu細(xì)胞、ES2細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞
L-M[TK-]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL 5細(xì)胞、VM-CUB-I細(xì)胞、184A1細(xì)胞
NCI-H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1299細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞
H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞、MGC803細(xì)胞
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