"RPMI-2650 Adherent人鼻腔上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:頭頸鱗癌;胸腔積液轉(zhuǎn)移;男性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RPMI-2650 Adherent人鼻腔上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
NEC-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-10細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞、KTA7細(xì)胞
MHCC97L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞
MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
FRhK4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH508細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞
FRhK4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH508細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞
LICR-LON-HN6-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
RPMI-2650 Adherent人鼻腔上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞
OCILY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB3細(xì)胞、SUM149細(xì)胞、CV-1細(xì)胞
SCC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細(xì)胞、TU 686細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞
NBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1 sq細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞
UT-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC-9810細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞、FL62891細(xì)胞
SKG-3a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞
2B4-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNF1細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞、GM04680細(xì)胞
SUNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10G41細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞
RAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2279細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞、HM06.A1細(xì)胞
CMT 167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK(1)細(xì)胞、VERO76細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞
NCI-H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL5細(xì)胞、GM03573細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞
HO1-N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞、YH-13細(xì)胞
H-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1359細(xì)胞、H64細(xì)胞、KALS1細(xì)胞
RPMI-2650 Adherent人鼻腔上皮細(xì)胞系
TE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞、DLM8細(xì)胞
SUM-149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞
NMC-G1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB157細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞、PanC1細(xì)胞
NMC-G1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB157細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞、PanC1細(xì)胞
HCC0202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-CPAP細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞
WM451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 1.Tes細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞、NK10a細(xì)胞
Ball 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-H2細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞
VP303細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞
MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Ardle 7777細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞
MDBK (NBL-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H378細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞
NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞
MDA453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT-6細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞
MC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1112Sk細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞
OVISE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細(xì)胞、H2087細(xì)胞、HM細(xì)胞
NCI-H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2286細(xì)胞、HC11細(xì)胞、FAT細(xì)胞
HHUA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266BL細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞
LNCaP C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480E細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞、NK92細(xì)胞
H-865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5細(xì)胞、A20細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞
AML 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225 K6細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞
WM266mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma-22細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞
Detroit 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL6細(xì)胞、PaTu 8988s細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞
Ca Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、D-407細(xì)胞
H2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-562細(xì)胞、P560細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞
Psi-2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT 8810細(xì)胞、SJRH 30細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞
K422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N2a細(xì)胞、DHL-8細(xì)胞、Chang Cells細(xì)胞
LN229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞
Anip 973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞
EBTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE2細(xì)胞、SNU869細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞
MOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞
NK-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞
B16/F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/ag細(xì)胞、SW-839細(xì)胞、ATN1細(xì)胞
OVCA-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞
ST 486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞、BMF細(xì)胞
H4IIE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1975細(xì)胞、M109細(xì)胞、C4I細(xì)胞
Hs-688A-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP.FGC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞
H-1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞
DH-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細(xì)胞、CMT167細(xì)胞、BC-009細(xì)胞
DH-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細(xì)胞、CMT167細(xì)胞、BC-009細(xì)胞
253JBV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT549細(xì)胞、Hs 578.T細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞
NHEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 435細(xì)胞、526 mel細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞
CMT93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞
MOLP8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341MD細(xì)胞、LX-2細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞
RPMI-2650 Adherent人鼻腔上皮細(xì)胞系
Eca-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL1細(xì)胞、F-36P細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞
HCT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞
MLMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞
H-1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞
BTT739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-937細(xì)胞、H1869細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞
HM1900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636.T細(xì)胞、RFL6細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞
FU-MMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1a細(xì)胞、H-522細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞
RL95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 166細(xì)胞、GM03570細(xì)胞、Molm 13細(xì)胞
H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞、CP70細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA細(xì)胞、BV2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞
RBMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2 4510細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞
SCC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞
"