"TFK-1 Adherent人膽管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：膽管癌；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專(zhuān)用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
TFK-1 Adherent人膽管癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異，有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買(mǎi)，培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過(guò)０~２０℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時(shí)，更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個(gè)，可以區(qū)分為２００多種不同類(lèi)型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱(chēng)為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開(kāi)始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G０點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADRRES細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞
BEP2D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT102細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞
NCI-SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-02-03細(xì)胞、Madison細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
U 138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-MEL細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞
SUD6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1623細(xì)胞、RCS細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞
SBC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M[TK-]細(xì)胞、RPE1細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
TFK-1 Adherent人膽管癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
GM16136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM1細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞
SUM190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞、SCC15細(xì)胞
NCI-H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS-1細(xì)胞、MAC1細(xì)胞、K-1735細(xì)胞
NCIH2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-422細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞
H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-100細(xì)胞、PC 61細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞
HUVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1436細(xì)胞、H2081細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞
hEM15A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2591細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、M-14細(xì)胞
Z310細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI660細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞
NH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-2細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞
TM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞、746T細(xì)胞
NCI-H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2141細(xì)胞、MV 3細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞
CORL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1299細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞
TFK-1 Adherent人膽管癌細(xì)胞系
Sol8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW2647細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞
H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M21細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞、HGE細(xì)胞
SW-982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LADMAC細(xì)胞、C4I細(xì)胞、YD-38細(xì)胞
SW-982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LADMAC細(xì)胞、C4I細(xì)胞、YD-38細(xì)胞
GTL16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1184細(xì)胞、H-1341細(xì)胞、MBVP細(xì)胞
Jiyoye (P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1299細(xì)胞、COS1細(xì)胞、HMCB細(xì)胞
COLO394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：373 MG細(xì)胞、BE2-M17細(xì)胞、RGM1細(xì)胞
Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC-1細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞、3AO細(xì)胞
HUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG-56細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞
H-2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-99A細(xì)胞、WiDr細(xì)胞、WM115F細(xì)胞
LNCaP.FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-19細(xì)胞、B10BR細(xì)胞、SW-1417細(xì)胞
8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCD細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞、293細(xì)胞
MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞
H1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB.4細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞
McARH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIADR.RES細(xì)胞、MRCV細(xì)胞、MASMC細(xì)胞
LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞
WM 239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164 TC細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞
NCI-H1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC Sup細(xì)胞、Hs695細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-446細(xì)胞、RL細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞
CHO K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞
KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞
V79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII-WT細(xì)胞、SW-948細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞
U-266 AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC1細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞、H1819細(xì)胞
RMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-2細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞
MN60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-679細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞、WISH細(xì)胞
159 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2細(xì)胞、H526細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞
C33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1770細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901/DDP細(xì)胞、BAEC細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞
L-WRN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞、CW-2細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞
PC-3/M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：184A1細(xì)胞、NCM356細(xì)胞、H1155細(xì)胞
MC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT2細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞
RPMI-7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T HEECs細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞、Hs281T細(xì)胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCLY8細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、HPAF細(xì)胞
SUP T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-325細(xì)胞、MT-2細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞
H-345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79細(xì)胞、X63.Ag8.653細(xì)胞、MDA-PCa-2b細(xì)胞
NCI-H1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOPC細(xì)胞、SEM細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞
SW1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT325細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞
T-ALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H716細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞
Nb2-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2444細(xì)胞、L-363細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞
TFK-1 Adherent人膽管癌細(xì)胞系
32D.cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞、QBC939細(xì)胞
MGc80-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B細(xì)胞、T98-G細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞
IAR 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG-108-15細(xì)胞、N9細(xì)胞、293 F細(xì)胞
GM03569B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1819細(xì)胞、HCC1588細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞
MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
ONS76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細(xì)胞、He-La細(xì)胞、MG63細(xì)胞
GM06141B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞、H-719細(xì)胞
NTERA-2 clone D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H226細(xì)胞、H-226細(xì)胞、C81-61細(xì)胞
WM115F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2S細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞
CCLP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW-039細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞、SKml2細(xì)胞
H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1618細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、VE細(xì)胞
NCI-H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS-1細(xì)胞、COLO678細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞
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