"FL 62891 Adherent人肝細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:肝;SV40轉(zhuǎn)化;男性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
FL 62891 Adherent人肝細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
MS751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞
SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGP細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞、Ly7細(xì)胞
KMS-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR10細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞、BT細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
NCI-H2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 180細(xì)胞、H22細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞
TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
FL 62891 Adherent人肝細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2E8細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞
FCCH1024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA細(xì)胞、KBM-7細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞
Panc02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2198細(xì)胞、U118MG細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2BBe細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞、H157細(xì)胞
NCI-H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GRSL細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞
4T1.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG-44細(xì)胞、143 B細(xì)胞、Colon26細(xì)胞
DCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM16136細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞、DU_145細(xì)胞
NTERA-2cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHBE細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞
JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞、RC92A細(xì)胞
CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC90細(xì)胞、L 540細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞
hEEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa017C細(xì)胞、A-2780細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞
H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_04_03細(xì)胞、ME180細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞
Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaSki細(xì)胞、28SC細(xì)胞、LS-123細(xì)胞
FL 62891 Adherent人肝細(xì)胞系
WML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106細(xì)胞、BCP1細(xì)胞、K7M2細(xì)胞
MDAMB175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1018細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞、H292細(xì)胞
CWR22-R1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bat lung細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、LS-411細(xì)胞
Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞
ACC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-8細(xì)胞、GM637細(xì)胞、EFO27細(xì)胞
Nb2-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2444細(xì)胞、L-363細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞
Panc-05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1353細(xì)胞、WEHI164細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞
CAL 85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞
ACC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-8細(xì)胞、GM637細(xì)胞、EFO27細(xì)胞
P3X63 Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2291細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞
CCD 841 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD4細(xì)胞、DF-1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞
ECC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞
MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞
H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞
CAOV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEL細(xì)胞、ACHN細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞
HSC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 900細(xì)胞、AR42J細(xì)胞、H-510A細(xì)胞
SW-626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3 M細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞
H1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 125細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞
NIH 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR42J細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞
Pa017C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA802細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞、Li-7細(xì)胞
NCI-H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1668細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞
NCI747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N87細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞
Hs 578.Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2107細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞、HL-60細(xì)胞
UCLA SO M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞
A204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 102細(xì)胞、KY-270細(xì)胞、TK10細(xì)胞
Raji細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VAESBJ細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞
HSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435S細(xì)胞、AC29細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞
RBL-2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192B細(xì)胞、KB細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞
no.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞
JJN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DrG細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766細(xì)胞、H-676細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞
HTR-8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV-90細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞、PC-12細(xì)胞
MDA-MB-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞、CTX TNA2細(xì)胞
CZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST細(xì)胞、EFO-27細(xì)胞、HMC細(xì)胞
SW954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS81細(xì)胞、MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、HCC15細(xì)胞
Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP 1細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞
HEK-293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32Dcl3細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞
huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞
MGC803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780-CP細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞、CEM細(xì)胞
HEL-92_1_7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-IIIa細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞
GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞
FL 62891 Adherent人肝細(xì)胞系
NCI-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、CHG5細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞
NTera 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N1E115細(xì)胞、NK62a細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞
RPMI-8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epithelioma-2細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞、Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞
MDA MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y-R細(xì)胞、MX1細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞
C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSF細(xì)胞、SW-962細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞
B95.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細(xì)胞、HT29細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞
LP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞、AML12細(xì)胞
PTK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIII細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞
Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞
LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH244細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞、H69C細(xì)胞
Henrietta Lacks cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM 9細(xì)胞、U 937細(xì)胞、ECV細(xì)胞
Panc02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2198細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞
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