"SIRC Adherent兔角膜上皮細胞系
細胞背景資料:角膜;上皮細胞
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SIRC Adherent兔角膜上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
U-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞
Kasumi-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1623細胞、HL-60 Clone 15細胞、NCI-H1155細胞
P3X63Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
YT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞
hESC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCAP37細胞、TE12細胞、174xCEM.T2細胞
RCC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞
細胞生長特性:貼壁
SIRC Adherent兔角膜上皮細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
KM.12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞
NCI-H78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞
293GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞
Psi2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH128細胞、A9(Hamprecht)細胞、ML2細胞
IGROV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H226細胞、GH3細胞、SW982細胞
EU-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞
HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞
SKRC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞
Jurkat E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-2細胞、P3J-HR-1細胞、MOLM13細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞
H-1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞
MIA PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
Ca761細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2170細胞、ST細胞、PTK 1細胞
SIRC Adherent兔角膜上皮細胞系
SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
IR983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞
DU 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞
DU 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞
HEK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0366細胞、SUM-102細胞、Namalva細胞
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞
PLC/PRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
TU 686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
MOLT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
SK-N-BE(2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞
SKRC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞
HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
W133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN 4細胞、UPCISCC090細胞、Sp2/0細胞
CEM.C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:10RGB細胞、NCIH23細胞、MN-9D細胞
SNU-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
KYSE-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞
Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
GA-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3-L1細胞、HIEC-6細胞、K1細胞
KGN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SO-RB50細胞、HS688AT細胞、SKCO1細胞
NCTC929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞
NCI-H847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalwa細胞、NCI-H-128細胞、IPLB-SF 21AE細胞
OUMS27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-177細胞、SK-GT-2細胞、Panc_02_03細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞
HS0578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞
HEMCSS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:STTG1細胞、SKCO 1細胞、RL95細胞
U118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞
A 172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞
GM-346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞
Hepa-RG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
WM-2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mahlavu細胞、SNUC2B細胞、MDCK supertube細胞
HCMEC(BL12-H)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞
SW-756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
FL 62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞
CL-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞
HEC-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB/ALL細胞、SW-982細胞、H226細胞
McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
NCI-H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
SIRC Adherent兔角膜上皮細胞系
D-324 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-182細胞、HCT-116細胞、H2066細胞
NIH3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE 37細胞、Hs294細胞、HCC38細胞
Pa16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞
MRC 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-C細胞、PE CA PJ34細胞、RC-4B細胞
VM-CUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
MM134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
NCI-SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
KP-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞
HONE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
NCIH596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-212細胞、VMM5細胞、UPCI:SCC090細胞
2V6.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21AE細胞、HCM細胞、SNU-354細胞
293GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT.549細胞、MDA-436細胞、SCC15細胞
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