"SIRC Adherent兔角膜上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：角膜；上皮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了，減少對(duì)胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話(huà)也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話(huà)，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很?chē)?yán)格的話(huà)，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì))，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過(guò)度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
SIRC Adherent兔角膜上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法：開(kāi)始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬(wàn)單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫(xiě)傳代記錄。
U-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606細(xì)胞、293E細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞
Kasumi-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1623細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞
P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102PT細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞、RT112細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
YT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞
hESC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCAP37細(xì)胞、TE12細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞
RCC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC4細(xì)胞、H2108細(xì)胞、P116細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
SIRC Adherent兔角膜上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長(zhǎng)不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
KM.12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS細(xì)胞、GM02131細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞
NCI-H78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK LU 1細(xì)胞、PK-136細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞
293GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT.549細(xì)胞、H-23細(xì)胞、R3/1細(xì)胞
Psi2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH128細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞、ML2細(xì)胞
IGROV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H226細(xì)胞、GH3細(xì)胞、SW982細(xì)胞
EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞
HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞
SKRC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2342細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞
Jurkat E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-2細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞
Ramos 2G6 4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-04-03細(xì)胞、TE-85細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞
H-1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 92.1.7細(xì)胞、526-mel細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞
MIA PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H82細(xì)胞、SP2細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞
Ca761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2170細(xì)胞、ST細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞
SIRC Adherent兔角膜上皮細(xì)胞系
SF 539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞、NH6細(xì)胞
IR983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞、EL-4細(xì)胞
DU 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Lens-124細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞
DU 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Lens-124細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞
HEK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0366細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞、Namalva細(xì)胞
H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞
SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞
PLC/PRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 510細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞
IEC18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞
TU 686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NF639細(xì)胞、KOPN8細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞
MOLT-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKBML細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞
C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSF細(xì)胞、SW-962細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞
SK-N-BE(2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP8細(xì)胞、INS1E細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞
SKRC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2342細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞
HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞
W133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN 4細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞
CEM.C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：10RGB細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞
SNU-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcerEpic細(xì)胞、P36細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞
KYSE-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs604T細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞、SW 620細(xì)胞
Hela-Ap-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞
GA-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3-L1細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞、K1細(xì)胞
KGN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-RB50細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞
NCTC929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW-42細(xì)胞、GM07404細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞
NCI-H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalwa細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞
OUMS27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-177細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676B細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞
HS0578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cells (TK-)細(xì)胞、TK 10細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞
HEMCSS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：STTG1細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞、RL95細(xì)胞
U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞
A 172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A427細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞
GM-346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVHM細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞、NBLS細(xì)胞
Hepa-RG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞
WM-2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mahlavu細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞
HCMEC(BL12-H)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR10細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞
SW-756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞
FL 62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL60細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞
CL-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA134細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞
HEC-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB/ALL細(xì)胞、SW-982細(xì)胞、H226細(xì)胞
McA-RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1373細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞
NCI-H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 88 D1細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞
KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞
SIRC Adherent兔角膜上皮細(xì)胞系
D-324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-182細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞、H2066細(xì)胞
NIH3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE 37細(xì)胞、Hs294細(xì)胞、HCC38細(xì)胞
Pa16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F9細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞
MRC 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2-C細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞
VM-CUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞
MM134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞
NCI-SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH細(xì)胞、NTERA-2細(xì)胞、T98細(xì)胞
KP-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ES-2細(xì)胞、IR983F細(xì)胞、P-19細(xì)胞
HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞
NCIH596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-212細(xì)胞、VMM5細(xì)胞、UPCI:SCC090細(xì)胞
2V6.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21AE細(xì)胞、HCM細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞
293GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT.549細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞、SCC15細(xì)胞
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