"MBT-2 Adherent小鼠膀胱癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：膀胱移行細(xì)胞癌；C３H/He
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細(xì)胞都污染一個細(xì)菌的話，這個細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MBT-2 Adherent小鼠膀胱癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞
HCC1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞
TERT-RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-55細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞、H4-II-E細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Co-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞
MGC803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780-CP細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞、CEM細(xì)胞
KYSE 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
MBT-2 Adherent小鼠膀胱癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞
COLO-699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LI7細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞
SACC83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞、MLMA細(xì)胞、SF17細(xì)胞
BC-023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL5細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞
HET1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L279細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞、HAVSMC細(xì)胞
Nakata-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2172細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞
Tu-686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD 293細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞
H-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP 4細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞、BSC1細(xì)胞
ARPE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL3細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞
hTERT RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7703細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞、G519細(xì)胞
SVHUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2052細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞
CAL-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7404細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞
MBT-2 Adherent小鼠膀胱癌細(xì)胞系
LS 513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H292細(xì)胞、Molm14細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞
HPAEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-38細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞
MDA-MB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-795細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞
MDA-MB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-795細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞
PLA802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaES-17細(xì)胞、HS-5細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞
MHCC97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞
Caco2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5B1-4細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞、LS174T細(xì)胞
CMT 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FaDu細(xì)胞、Hs445細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM460細(xì)胞、HNE2細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞
U373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞、H-1395細(xì)胞
TH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9(Hamprecht)細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、SC1細(xì)胞
MFHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal fibroblast-10細(xì)胞、KLN205細(xì)胞、H-2198細(xì)胞
Nb-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C666-1細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞、CL40細(xì)胞
NCI-H1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-146細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞、RSMC細(xì)胞
Hk-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B5537SKIN細(xì)胞、BT20細(xì)胞、PC-10細(xì)胞
PANC 203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE4細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞
EOMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞、H-548細(xì)胞
Tca-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞
H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-6細(xì)胞、H841細(xì)胞、HCV-29細(xì)胞
EFM192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8-653細(xì)胞、HSC（Human Schwann）細(xì)胞、SU-DHL-8細(xì)胞
7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF II細(xì)胞、IMR90細(xì)胞、RS411細(xì)胞
U-343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1-BL細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞、786-0細(xì)胞
H22-H8D8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞
SF-763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF SB細(xì)胞、RH8994細(xì)胞、L cell line細(xì)胞
EoL-1-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL細(xì)胞、H-1048細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞
T-98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKml2細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞
KP 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Saos2細(xì)胞、D341Med細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞
Metastatic Variant-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2291細(xì)胞、GH 3細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞
BHP10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-SM細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞
KMS-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH-77細(xì)胞、H-2110細(xì)胞、HME1細(xì)胞
H-358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細(xì)胞、H-2126細(xì)胞、MG-63細(xì)胞
H-2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-226細(xì)胞、Hs683細(xì)胞、D324 Med細(xì)胞
SH-SY5Y Parental細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-70細(xì)胞、YD38細(xì)胞、Calu6細(xì)胞
BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL62細(xì)胞、Hs729細(xì)胞、HemECs細(xì)胞
GC-1 spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H3255細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞
KRCY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-II細(xì)胞、Ly18細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞
PMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H1細(xì)胞、FM-88細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞
PMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H1細(xì)胞、FM-88細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞
ZR751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞
BCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M4e細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞
CNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPBALL細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞
SNU886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞
MBT-2 Adherent小鼠膀胱癌細(xì)胞系
H-1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1-Lu細(xì)胞、ES2細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞
BAR-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞
MCF 10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly01細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞
NCI-H1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞
HuT-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK1細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、LS-513細(xì)胞
OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞
PK15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 2664細(xì)胞、HEC151細(xì)胞、Mel RM細(xì)胞
H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞
SW-527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293E細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞
HPDLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2935細(xì)胞、H322細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞
MUTZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM1細(xì)胞、BC-009細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞
SACC83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、SW962細(xì)胞
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