"MBT-2 epithelioid cells小鼠膀胱癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:膀胱移行細(xì)胞癌;C3H/He 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 NCI-H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞 Tu177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT64細(xì)胞、Mhh-Call 2細(xì)胞、HPDE細(xì)胞 PANC 813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT GEO細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞、PM6細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 MBT-2 epithelioid cells小鼠膀胱癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞 Hs-578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN 60細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞 H.Ep. No. 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 2H3細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞 NCIH2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞 Hepa-RG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MBT-2 epithelioid cells小鼠膀胱癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 H-1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431/P細(xì)胞、SC1細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞 MMVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE 280細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞 U-138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-20Y細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞、HFTF細(xì)胞 MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞 Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞 YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞 NCI-HUT-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR-1細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞、MF2059細(xì)胞 EA hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637B細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞、HS-68細(xì)胞 CTV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、T-98G細(xì)胞、FLS細(xì)胞 GM2219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AK細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞、Loucy細(xì)胞 MBT-2 epithelioid cells小鼠膀胱癌細(xì)胞系 A375-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6-P2T細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞 COLO 201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞 NCI-H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/0HK細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞 Kato-III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞、ME180細(xì)胞 MJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN細(xì)胞、NCI-SNU-119細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞 PNT1/A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞 PNT1/A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞 SCCVII/St細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-327細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞、LS 180細(xì)胞 MLFC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Carcinoma-38細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞、MM1細(xì)胞 IOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞 MDA-MB-435 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2細(xì)胞、DHL6細(xì)胞、INS1E細(xì)胞 Chinese Hamster Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1568細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞 SKCol1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT 20細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞 BNCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 2細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞、A72細(xì)胞 HCC-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-2細(xì)胞、BLO11細(xì)胞、TH1細(xì)胞 BetaTC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-OVCAR-3細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞、A-172細(xì)胞 H-1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2023細(xì)胞、MIN6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞 HCC-2279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEC細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞、UO31細(xì)胞 CoC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞 FAO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 174 T細(xì)胞、CORL23細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞 J 82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK-13細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、REC細(xì)胞 CCD841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-72細(xì)胞、MFM223細(xì)胞、U-343細(xì)胞 NCI-H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC14細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞 SW-1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N-1細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞 CWR-22rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-929細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞、DF-1細(xì)胞 IMR32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu686細(xì)胞、TE8細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞 CCC-ESF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1781細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞、MB231細(xì)胞 NCI-H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞、C643細(xì)胞 HK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 10細(xì)胞、2E8細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞 A-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Raji細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞 RT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRFCEM細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞 Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-12細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞、CAL27細(xì)胞 253J-BV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2/E6E7細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞 ChaGo K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCH1細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞 SK-HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM-1細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞 hTERT-RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SAS細(xì)胞、MASMC細(xì)胞、TE32細(xì)胞 RKO-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RetroPack PT67細(xì)胞、HMEL細(xì)胞、SF126細(xì)胞 HTR8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS7細(xì)胞、P19細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞 HCC1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-388細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞 LU-65M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE19細(xì)胞、LL/2細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞 NCI-H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE13細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞 IM 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 J2細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞 HSF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF-7細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞 HANK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞 NB1RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、H-1819細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞 TE11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、OUMS-27細(xì)胞、U2OS細(xì)胞 OUMS23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA795細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞、Panc 03.27細(xì)胞 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